Question

金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物，可引起人类肺炎、肠炎等疾病．金黄色葡萄球菌在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色．如图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程，请回答相关问题．

（1）操作中在血平板上的接种方法是

 

，接种操作前后需要对接种工具进行

 

灭菌．
（2）用7.5% NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是

 

．
（3）在制备血平板时需将pH调节至

 

（“微酸性”或“微碱性”）后灭菌，待培养基

 

后，再加入适量血液．按培养基功能分类，血平板属于

 

培养基．
（4）多次规范操作、重复实验，血平板上均出现

 

的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带，因此，需要对本次操作进行完善，完善的方案是

 

．
（5）为了检测其中某种菌对于抗生素的敏感性，取该单菌落适当稀释，接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板．将分别含有A、B两种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A

 

；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该病菌对抗生素B

 

．为方便后续使用该菌种，可将菌液用

 

的方法长期保存．

Answer 1

考点：微生物的分离和培养,培养基对微生物的选择作用

专题：

分析：（1）微生物的营养物质有5类，分别是水、无机盐、碳源、氮源及生长因子．
（2）培养基按功能分为选择培养基和鉴别培养基：
①选择培养基：培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物生长，培养、分离出特定的微生物（如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐）
②鉴别培养基：根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品，鉴别不同种类的微生物，如可用伊红-美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌（若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽）
（3）接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体--菌落．
（4）对相应抗生素敏感的细菌，在含有抗生素的培养基上不能生长；反之，则能生长．

解答： 解：（1）使用接种环进行接种应该只用平板划线法；接种工具灭菌的方式是灼烧灭菌．
（2）用7.5%NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是分离出金黄色葡萄球菌．
（3）血液是碱性的，所以培养基应该调至碱性；灭菌法方法是高压蒸汽灭菌法，所以应该等到培养基冷却后加入血液，否则会破坏血细胞；由于该培养基能够鉴别是否含有葡萄球菌，所以属于鉴别培养基．
（4）根据题意，“金黄色葡萄球菌在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色”，所以如果经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现透明圈的菌落，说明初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌；但这个实验要这是对照实验，对照实验的设计是在培养基中不加鲜牛奶．
（5）对相应抗生素敏感的细菌，在含有抗生素的培养基上不能生长；反之，则能生长．含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A敏感；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B不敏感；菌种长期保存，用甘油管藏的方法．
故答案为：（1）平板划线法      灼烧    
（2）分离出金黄色葡萄球菌
（3）微碱性   冷却     鉴别
（4）周围存在透明圈    设置不加鲜牛奶其他操作均相同的对照组
（5）敏感  不敏感  甘油管藏

点评：在本题中设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度，对照实验的设计的重点是单一变量原则，在本题中单一变量的原则的设计是在培养基中是否加入鲜牛奶．