题目内容

常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵,而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精,但是对酒精的耐受能力差.科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母.请分析回答下列问题:

(1)制备酵母菌培养基要进行倒平板操作,待平板冷凝后,要将平板倒置,其主要原因是 _________

(2)取从自然界中采集的葡萄,用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,然后按图甲所示过程进行酵母菌的纯化培养.图乙是经过图甲过程A 纯化培养的结果,在培养基上接种时划线的顺序依次是 _________ (用编号表示).研究者在图甲过程C 的操作培养过程中,得到了一个经培养后菌落分布如图丙所示的平板,推测接种时可能的操作失误是 _________

(3)将培养基上的酵母菌菌株转接到仅以 _________ 为碳源的培养基中,无氧条件下培养一周后,有些酵母菌死亡,说明这些酵母菌不能利用木糖发酵.

(4)从以上筛选得到的活酵母菌中提取DNA,利用PCR 技术大量扩增获得目的基因.若将1个目的基因分子复制10 次,则需要在缓冲液中至少加入 _________ 个引物.将目的基因连接到具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因的质粒上,然后将所得的重组质粒导入酵母菌时,应选择缺乏 _________ 能力的酿酒酵母作为受体菌.

(5)将经上述流程培育获得的转基因酿酒酵母接种在含 _________ 的培养基中进行酒精发酵能力测试.随着发酵的持续进行,若该酿酒酵母能够存活,说明它能 _________ ,即说明所需菌株培育成功.

练习册系列答案
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4. DNA复制可以通过设想来进行预测,可能的情况是:全保留复制、半保留复制、分散复制.
(1)根据如图中的示例对三种复制作出可能的假设:①如果是全保留复制,则一个DNA分子形成两个DNA分子,其中一个是亲代的,而另一个是新形成的.
②如果是半保留复制,则新形成的两个DNA分子,各有一条链来自亲代DNA分子,另一条链是新形成的.
③如果是分散复制,则新形成的DNA分子中每条链中一些片段是母链而另一些则是子链片断.
(2)究竟是哪种复制方式呢?请大家设计实验来证明DNA的复制方式.
实验步骤:
①在氮源为14N的培养基中生长的大肠杆菌,其DNA分子均为14N-DNA(对照).
②在氮源为15N的培养基中生长的大肠杆菌,其DNA分子均为15N-DNA(亲代).
③将亲代15N大肠杆菌转移到含14N的培养基中,再连续繁殖两代(Ⅰ和Ⅱ),用密度梯度离心方法分离.
实验预测:
①如果与对照(14N/14N)相比,子代Ⅰ能分辨出两条DNA带,即一条轻带(14N/14N)和一条重带(15N/15N),则可以排除半保留和分散复制;
②如果子代Ⅰ只有一条中等密度带,则可以排除全保留复制但不能肯定是半保留复制或分散复制;
③如果子代Ⅰ只有一条中等密度带,再继续做子代ⅡDNA密度鉴定,若子代Ⅱ可以分出中等密度带和轻密度带,则可以排除分散复制,同时肯定半保留复制;
④如果子代Ⅱ不能分出中等和轻密度两条带,则排除半保留复制,同时确定为分散复制.

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