Question

13． 分离特定微生物及生物大分子为生产生活实践提供便利，是生物技术发展的优越性之一．  回答下列问题：
  （1）从土壤中分离能分解石油的细菌，应采用选择（按功能划分）培养基进行培养，为了获得单个菌落，可采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，接种过程应在酒精灯火焰旁附近进行，菌落周围的透明圈越大，说明该菌株降解石油的能力越强．
  （2）实验室常采用凝胶色谱法分离血红蛋白，分离前，对血红蛋白水溶液进行透析的目的是去除相对分子量较小的杂质．图中能正确表示相对分子质量不同蛋白质在凝胶中行进的过程的是B，相对分子质量大的蛋白质，经过的路程较短（填“较短”或“较长”）．

Answer 1

分析 （1）培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐．培养基的分类：①按物理性质分，分为液体培养基和固体培养基，固体培养基中含有凝固剂，一般是琼脂．②按化学成分分，分为天然培养基和合成培养．两者的区别是天然培养基成分不确定，合成培养基成分的含量是确定的．③按用途分，分为选择培养基和鉴别培养基．选择培养基主要是培养、分离特定的微生物，培养酵母菌可在培养基中加入青霉素；鉴别培养基可以鉴定不同的微生物，比如鉴别饮用水中是否含有大肠杆菌，可以用伊红-美蓝培养基，如果菌落呈深紫色，并带有金属光泽，说明有大肠杆菌．
（2）常用灭菌方法：灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法．
培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次：高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒法．
（3）接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体--菌落．
（4）凝胶色谱法分离蛋白质的原理：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离．

解答 解：（1）欲筛选出能降解石油的菌株，培养基中应只含有原油而无其它碳源，不能降解原油的细菌在此培养基上不能生存，这类培养基属于选择培养基．分离纯化菌种时，需采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，使聚集在一起的细菌细胞分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，以便纯化菌种．无菌操作要求在整个实验过程中操作都在酒精灯火焰附近进行，以避免周围微生物的污染．降解原油能力越强的菌株，在菌落周围形成的分解圈越大．
（2）血红蛋白溶液的粗分离采用的方法是透析，即将集的血红蛋白溶液放在透析袋中进行透析，去掉分子量较小的杂质，原理是小分子杂质可以通过透析袋进入缓冲液中，血红蛋白分子量较大，不能通过透析袋进入缓冲溶液．相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快．
故答案为：
（1）选择    平板划线法　稀释涂布平板法   酒精灯火焰旁    强
（2）去除相对分子量较小的杂质  B  较短

点评 本题的知识点是微生物培养过程中的无菌技术，分离微生物的常用的接种方法和血红蛋白的提取和分离，主要考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力．