题目内容

【题目】回答下列(一)、(二)小题。

(一)镇江香醋素以“酸而不涩、香而微甜、色浓味鲜”而蜚声中外。下图是镇江香醋的生产工艺简化流程:

(1)蒸煮的目的:使原料在高温下灭菌,同时_________,淀粉被释放出来,淀粉由颗粒状变为溶胶状态。

(2)由于酵母菌缺少淀粉水解酶系,糯米需经蒸煮后在a-淀粉酶的作用下液化,后加入糖化酶糖化,目的是_________。30min后,装入发酵罐再接入酵母进行_________。在操作过程中,发酵罐先通气,后密闭。通气能提高_________的数量,有利于密闭时获得更多的酒精产物。

(3)醋酸发酵时酒精应先_________,否则会因浓度过高抑制醋杆菌的增殖。发酵过程需敞口操作,麸皮和糠等拌匀制作成松散的发酵料,其目的是_________。发酵过程中可通过高效液相色谱技术对多种有机酸组成及动态变化进行研究。将_________在相同的色谱条件下进行检测,绘制标准曲线。再根据其对发酵过程中的有机酸含量进行测算跟踪发酵进程。

(4)黑曲霉可产生a-淀粉酶用于液化,还可以产生果胶酶将果胶彻底分解为_________。

(二)请回答下列与基因工程和植物克隆有关的问题。

(1)质粒的抗性基因是常用的_________标记,如果质粒的抗性基因内有若干单一的限制性酶切位点就更好。当外源基因插入这样的酶切位点时,会使该抗性基因失活,这时宿主菌变为对该抗生素_________的菌株,容易检测出来。

(2)双酶切会使载体和目的基因的DNA都产生两种不同的粘性末端,但DNA连接酶在适宜pH条件下会选择把_________连接起来,从而保证目的基因只以一个方向连接入载体。影响DNA连接反应的因素有_________(写出两点)。

(3)花药培养是单倍体克隆的主要方法。花药再生植株的产生有两条途径:一是烟草等植物通过形成花粉胚的_________途径,二是水稻等植物通过产生芽和根的_________途径,最后发育成单倍体植物。水稻花药培养除了得到单倍体植物,还可以得到来源于花药体细胞的_________植株,因此需要对后代进行进一步的筛选。

【答案】使植物细胞破裂 将淀粉分解成糖 酒精发酵 酵母菌 (用水)稀释 增加通气性 各种有机酸的标准溶液 半乳糖醛酸 筛选 敏感 相同的粘性末端 温度、酶的用量、反应时间 胚胎发生 器官发生 二倍体

【解析】

基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定。

(一)(1)蒸煮的目的:使原料在高温下灭菌,同时高温可以破坏细胞膜,使细胞中的淀粉被释放出来。

(2)淀粉在a-淀粉酶的作用下变成糊精,糊精在β-淀粉酶的作用下变成麦芽糖,麦芽糖在糖化淀粉酶的作用下变成葡萄糖。加入糖化酶糖化,目的是糖化。30min后,装入发酵罐再接入酵母进行酒精发酵,酵母菌利用葡萄糖进行厌氧呼吸可产生酒精。酵母菌繁殖需要能量,而需氧呼吸能提供更多的能量,通气能提高酵母菌的数量,有利于密闭时获得更多的酒精产物。

(3)酒精含量过高,醋杆菌容易死亡,因此醋酸发酵时酒精应先(用水)稀释。发酵过程需敞口操作,麸皮和糠等拌匀制作成松散的发酵料,都是为了增加通气性。将各种有机酸的标准溶液在相同的色谱条件下进行检测,绘制标准曲线。再根据其对发酵过程中的有机酸含量进行测算跟踪发酵进程。

(4)果胶是半乳糖醛酸的高聚物,果胶酶可将果胶彻底分解为半乳糖醛酸。

(二)(1)质粒常含有抗性基因用于重组质粒的筛选。当外源基因插入这样的酶切位点时,会使该抗性基因失活,抗性基因无法表达,这时宿主菌变为对该抗生素敏感的菌株,容易检测出来。

(2)双酶切会使载体和目的基因的DNA都产生两种不同的粘性末端,但DNA连接酶在适宜pH条件下会选择把相同的粘性末端连接起来,避免单酶切使目的基因或质粒自连或反向连接,保证目的基因只以一个方向连接入载体。温度、酶的用量、反应时间都会影响DNA连接反应。

(3)花药再生植株的产生有两条途径:一是烟草等植物通过形成花粉胚的胚胎发生途径(胚是植物的幼体),二是水稻等植物通过产生芽和根的器官发生途径(芽、根是植物的器官),最后发育成单倍体植物。水稻花药培养除了得到单倍体植物,还可以得到来源于花药体细胞的二倍体植株(秋水仙素加倍),因此需要对后代进行进一步的筛选(表现型进行筛选)。

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