Question

19．一对表现型正常的夫妇，生了一个β地中海贫血症患儿．在他们欲生育第二胎时，发现妻子的双侧输卵管完全堵塞，不能完成体内受精．医生为该夫妇实施了体外受精和产前基因诊断，最终喜获一健康女婴．请回答：
（1）哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精 等主要步骤．
（2）在对胎儿进行β地中海贫血症的产前基因诊断时，要先从羊水中的胎儿细胞提取DNA进行PCR扩增，然后用限制酶对扩增产物进行切割，产生多个片段的酶切产物，再根据不同长度的酶切产物在电泳时移动的速率不同，形成不同的电泳条带进行判断．
①PCR扩增与体内DNA复制过程中，解旋的方法不同，前者通过高温解开双链，后者通过解旋酶解开双链．
②一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成．DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式，即黏性末端和平末端．当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时，产生的是黏性末端．
③利用PCR扩增目的基因也是目的基因获取的方法之一，除此以外，目的基因还可以从基因文库中获取，基因文库包含部分基因文库 和基因组文库 等类型，后者的基因中含有启动子．
④基因诊断的主要原理是DNA分子杂交（不可答“碱基互补配对”）．

Answer 1

分析 1、PCR的过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开．
2、限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．形成黏性末端和平末端两种．
3、基因诊断技术它的基本原理是：互补的DNA单链能够在一定条件下结合成双链，即能够进行杂交．这种结合是特异的，即严格按照碱基互补的原则进行，它不仅能在DNA和DNA之间进行，也能在DNA和RNA之间进行．因此，当用一段已知基因的核酸序列作出探针，与变性后的单链基因组DNA接触时，如果两者的碱基完全配对，它们即互补地结合成双链，从而表明被测基因组DNA中含有已知的基因序列．

解答 解：（1）哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精等主要步骤．
（2）①PCR扩增与体内DNA复制过程中，解旋的方法不同，前者通过高温解开双链，后者通过解旋酶解开双链．
②大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成．DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式，即黏性末端和平末端．当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时，产生的是黏性末端．
③基因文库包含部分基因文库和基因组文库

文库类型	cDNA	基因组文库
文库大小	小	大
基因中启动子	无	有
基因中内含子	无	有
基因多少	某种生物的部分基因	某种生物的全部基因
物种间的基因交流	可以	部分基因可以

④基因诊断的主要原理是DNA分子杂交．
故答案为：
（1）卵母细胞的采集和培养      精子的采集和获能     受精
（2）①高温    解旋酶      
②6    黏性末端
③部分基因文库    基因组文库       
④DNA分子杂交（不可答“碱基互补配对”）

点评 本题考查体外受精技术、基因工程的原理及技术，要求考生识记体外受精技术具体步骤；识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记层次的考查．