题目内容

【题目】真核生物基因编码区包含外显子和内含子,编码蛋白质的序列称为外显子,不编码蛋白质的序列称为内含子。研究表明肌张力障碍与相关基因内含子中CTG核苷酸序列多次重复有关。下图是肌张力障碍形成的一种假说模型,前体RNA中被剪切下来的重复RNA异常聚集(也称RNA团簇),使剪接因子失去功能而引起疾病。请回答:

(1)过程①属于____(变异类型)。

(2)过程②所需的原料是____,过程③先断裂再形成的化学键是____。

(3)与图中RNA团簇相比,基因中特有的碱基对是____。RNA团簇使剪接因子失去功能,会导致细胞中____(过程)的模板缺失。

(4)若基因内含子中CCT多次重复,能否引起RNA团簇,简要说明理由。_____________

(5)依据该模型推测,可通过阻断____治疗肌张力障碍。

【答案】基因突变 核糖核苷酸 磷酸二酯键 A—T 翻译 不能,剪切下来的重复RNA不能碱基互补配对 RNA团簇的形成(或RNA分子间碱基互补配对)

【解析】

据图分析,过程①中,基因编码区的内含子中CTG核苷酸序列发生了多次重复,为基因结构的改变,属于基因突变;过程②中基因编码区形成了前体RNA,表示的转录过程;过程③中,前体RNA在剪切因子的作用下形成成熟mRNA,表示的mRNA的加工过程;④过程中,以成熟的mRNA为模板,合成了功能蛋白,表示的是翻译。过程⑤表示剪切下来的重复RNA聚集成的RNA团簇。

(1)根据以上分析已知,过程①基因内部多了很多重复核苷酸序列,属于基因突变。

(2)根据以上分析已知,过程②表示转录,该过程的原料是四种核糖核苷酸;过程③是前体RNA在剪切因子的作用下形成成熟mRNA的过程,因此该过程先断裂再形成的化学键是磷酸二酯键。

(3)与图中RNA团簇相比,基因中特有的碱基对是A—T;RNA团簇使剪接因子失去功能,会导致成熟的mRNA不能形成,进而会导致细胞中④翻译的模板缺失。

(4)若基因内含子中CCT多次重复,是不会引起RNA团簇的,因为剪切下来的重复RNA不能碱基互补配对。

(5)根据该模型推测,可以通过RNA团簇的形成,进而治疗肌张力障碍。

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【题目】科研人员运用两种方法分离杜氏盐藻、球等鞭金藻细胞的叶绿体,并提取叶绿体DNA,主要实验步骤和结果如下,其中SDS能瓦解生物膜,氯仿异戊醇不溶于水且密度均大于水,DNA不溶于氯仿异戊醇。请回答:

步骤①收集藻细胞:将两种藻细胞培养液进行预处理后,离心取沉淀物。

步骤②获取叶绿体粗:提物4℃下分别破碎两种藻细胞后,再分别用差速离心法和密度梯度离心法分离获取叶绿体粗提物(原理示意图如下)。

步骤③去除杂质DNA:向步骤②的叶绿体粗提物中加入DNA酶、缓冲液,37℃静置15min后,离心取沉淀物。

步骤④粗提叶绿体DNA:向步骤③获得的叶绿体中加入缓冲液、SDS、蛋白酶K,60℃水浴2h,离心取上清液。再向上清液中加入氯仿异戊醇,在4℃下离心取 ? 。

步骤⑤纯化叶绿体DNA:向粗提溶液中加入3mol·L-1醋酸钠及预冷的95%酒精,低温静置1h后,离心弃上清液。加预冷的95%酒精、离心洗涤1~2次,取沉淀物用超纯水溶解。

步骤⑥DNA纯度和浓度:测定利用分光光度法测量并计算叶绿体DNA的纯度及浓度,结果如上右表(表中OD260/OD280值越接近1.8说明DNA越纯)。

(1)步骤①中预处理时应将藻液置于____处24h,以降低叶绿体中淀粉粒的含量,有利于分离得到完整叶绿体。步骤②在利用差速离心法分离获得叶绿体前,需要先在____(填“低于”“等于”或“高于”)4 000r·min-1下离心去除细胞壁、核物质等。

(2)步骤③依据的主要原理是____,去除的“杂质DNA”来源于____。

(3)步骤④中离心后应取____。步骤⑤中用95%的冷酒精离心洗涤过程要注意动作轻缓,其目的是____________________________________________________________。

(4)根据实验结果分析,____法较适于分离提取叶绿体DNA,原因是_________________________________________。

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