Question

2．有关平板划线操作不正确的是（　　）

• A． 将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可迅速彻底灭菌
• B． 在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰
• C． 除最后一次划线后以外，每次划线前后都要对接种环进行灭菌
• D． 最后将平板倒置，放入恒温箱中培养

Answer 1

分析 划线分离操作中的有关问题：
（1）在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环，在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环．

	第一次灼烧	每次划线之前灼烧	划线结束灼烧
目的	避免接种环上可能存在的微生物污染培养基	杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种	杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染或感染操作者

②在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，以免接种环温度太高，杀死菌种．
③在进行第二次以及其后的划线操作时'要从上一次划线的末端开始划线．每次划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落．
（2）进行恒温培养时，要将培养皿倒置的原因如果正放培养皿，则皿盖上形成的水滴会落入培 养基表面并且扩散开．如果培养皿中已形成菌落，则茵落中的细菌会随水扩散，菌落间相互影响，很难再分成单菌落，达不到分离的目的．因此恒温培养时，培养皿必须倒置．
（3）培养后判断是否有杂菌污染的方法
①从菌落的形态看，是否湿润、透明、黏稠，呈何种颜色等等，是区别细菌、酵母菌、放线菌和霉菌的关键指标．
②用显微镜镜检观察其形态、大小，看是否有菌丝、孢子、芽孢等，这也是区别细菌、酵母菌、放线菌和霉菌的关键指标．

解答 解：A、将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可迅速彻底灭菌，A正确；
B、在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰，B正确；
C、每次划线前后都要对接种环进行灭菌，最后一次划线后也要进行灭菌，C错误；
D、最后将平板倒置，放入恒温箱中培养，D正确．
故选：C．

点评 本题考查微生物的培养和分离，要求考生识记平板划线法的具体操作过程，掌握该过程中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确判断各选项．