题目内容
【题目】 I．为研究肝癌致病机理，利用下图所示方法和基因工程获取相关癌基因以进一步研究。
（1）上图中，A过程需要用________酶，D过程需要回收________（未杂交/杂交分子）的含32P的cDNA单链，继而通过人工合成，获得________，并用其构建基因文库。
II．上图是治疗性克隆时获取病人胚胎干细胞的过程。
（2）细胞①是病人的体细胞（如皮肤细胞），细胞②往往是处于_________期的卵母细胞。图示方法一和方法二都使用了去核卵母细胞，主要是因为_____________________。
（3）将分离出的胚胎干细胞放入有分化诱导因子的培养液中，诱导其分化成所需类型细胞或器官，完成该过程的实质是____________________。对于先天不能生成T细胞的免疫缺陷病人，需要诱导产生_________（填免疫器官）。
【答案】 逆转录 未杂交 双链cDNA 减数第二次分裂中期 卵母细胞的细胞质可以给体细胞的细胞核提供表达全能性的环境 基因的选择性表达 胸腺
【解析】本题考查基因工程中目的基因的提取、胚胎工程中的核移植等相关知识，解题要点是通过对图示内容的分析，掌握教材中生物工程相关的概念和操作步骤。
图中A过程是以mRNA为模板合成单链DNA过程，需要逆转录酶；由于正常细胞中不含癌基因，所以将正常细胞转录成的mRNA和肝癌细胞的mRNA逆转录成的cDNA混合后，含癌基因的cDNA不能形成杂交分子，将未杂交分子回收后，经人工合成的双链cDNA中含有癌基因，可用其构建基因文库。
（2）图中方法一为核移植技术，取病人体细胞（细胞①）的核，与处于减数第二次分裂中期的卵细胞（细胞②）的质形成重组细胞。核移植中供质的细胞一般取用去核卵母细胞，是因为卵母细胞的细胞质可以给体细胞的细胞核提供表达全能性的环境，有利于细胞核全能性的表达。
（3）细胞分化的实质是基因的选择性表达；骨髓干细胞增殖后，部分细胞迁移至胸腺中分化成T细胞，所以对于先天不能生成T细胞的免疫缺陷病人，需要诱导产生胸腺。
[点睛]：本题知识易错点：1.如何从肝癌细胞中筛选出目的基因（癌基因）：正常细胞与癌细胞相比，不含癌基因转录成的mRNA，由此根据DNA分子杂交原理，可筛选出未杂交分子，即含癌基因的cDNA；2. 克隆技术的图示方法一和方法二都使用了去核卵母细胞，主要是因为卵母细胞的细胞质可以给体细胞的细胞核提供表达全能性的环境，两种方法得到的细胞③和④相当于受精卵，处于⑤时期的胚胎叫囊胚。
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