题目内容
12．肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌．研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实验表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制．该基因工程技术基本流程如图1．
请回答：
（1）进行过程①时，需用限制性核酸内切酶酶切开载体以插入let-7基因．载体应用RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为启动子．
（2）进行过程②时，需用胰蛋白酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养．
（3）研究发现，let-7基因能影响RAS的表达，其影响机理如图2．据图分析，可从细胞提取RNA进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录．肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中RAS蛋白（RASmRNA/RAS蛋白）含量减少引起的．
分析 根据题意和图示分析可知：
图1表示利用基因工程技术将let一7基因导入肺癌细胞的流程，其中①表示基因表达载体的构建过程；②表示用胰蛋白酶处理组织细胞，使之成为单个细胞，再加细胞悬液进行细胞培养的过程．
图2表示let-7基因影响癌基因RAS的表达的原理，let-7基因转录产物miRNA与RAS基因转录产物RAS mRNA结合，使RAS基因翻译受到抑制，引起细胞中的RAS蛋白含量减少，进而导致癌细胞增殖受到抑制．
解答 解：（1）过程①表示基因表达载体的构建，在该过程中需要用限制性核酸内切酶对载体进行切割，以便于目的基因的插入；启动子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶识别和结合的位点，RNA聚合酶结合到该位点，可驱动转录过程．
（2）过程②表示动物细胞培养，培养过程中出现接触抑制后可以用胰蛋白酶处理，使之分散成单个的细胞，之后分装到其他培养瓶里面进行传代培养．
（3）判断目的基因是否在受体细胞中转录，可用分子杂交技术来检测，从细胞中提取mRNA和用放射性同位素或者荧光标记的目的基因单链DNA片段进行杂交．根据题中信息“肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌”知，导入let-7基因后，肺癌细胞的增殖受到抑制；据图2可知，let-7基因影响RAS基因表达的机理是：let-7基因转录产物miRNA与RAS基因转录产物RAS mRNA结合，使RAS基因翻译受到抑制，引起细胞中的RAS蛋白含量减少，进而导致癌细胞增殖受到抑制．
故答案为：
（1）限制性核酸内切酶（或限制）启动子
（2）胰蛋白
（3）RNA RAS蛋白
点评 本题考查基因工程的原理和技术、遗传信息的转录和翻译的相关知识，要求考生识记基因工程的工具和操作步骤．要求能分析图1，准确判断各过程的名称；掌握遗传信息的转录和表达过程，并能利用图2信息答题．
千里马走向假期期末仿真试卷寒假系列答案
| A． | 该限制酶能识别的碱基序列是GAATTC，切点在G和A之间 | |
| B． | 用此酶切割含有目的基因的片段时，必须用相应的限制酶切割运载体，以产生与目的基因相同的黏性末端 | |
| C． | 要把目的基因与运载体“缝合”起来，要用到基因工程的另一个工具--DNA聚合酶 | |
| D． | 限制酶切割DNA分子时，是破坏了同一条链上相邻脱氧核苷酸之间的化学键而不是两条链上互补配对的碱基之间的氢键 |
①转基因技术 ②植物体细胞杂交 ③植物组织培养 ④细胞融合．
| A． | ①②③ | B． | ②③④ | C． | ②③ | D． | ①④ |
| A． | $\frac{2}{3xy}$-6x+18α | B． | $\frac{1}{3xy}$-6x | C． | （$\frac{x}{3}$-α）•18 | D． | $\frac{xy}{3}$-（$\frac{x}{3}$-α）•18 |
| A． | 种群和种群之间 | B． | 种群内部个体和个体之间 | ||
| C． | 生物和环境之间 | D． | 以上三项都有 |
