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20.目前基因工程所用的质粒载体主要是以天然细菌质粒的各种元件为基础重新组建的人工质粒,pBR322质粒是较早构建的质粒载体,其主要结构如图一所示.

下列有关的说法中,不正确的是(  )
A.构建人工质粒时要有抗性基因,以便于筛选
B.目的基因两侧被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端是
C.两种限制酶(BamHⅠ和Bg1Ⅱ)切割得到的黏性末端不相同
D.限制酶和DNA连接酶作用的部位均为磷酸二酯键

分析 标记基因的生理功能是便于鉴定受体细胞中是否导入目的基因.菌落能在含有氨苄青霉素的培养基生存,说明了菌落含有抗氨苄青霉素基因;将沾上菌落绒布按到含四环素的培养基上培养,仍能生长,说明了菌落也含有抗四环素基因.

解答 解:A、质粒上的抗性基因可作标记基因,便于鉴定受体细胞中是否导入目的基因,A正确;
B、在目的基因的两侧各有1个EcoRⅠ的切点,即目的基因两侧有-GAATTC-,且EcoRⅠ的切割位点在G和A之间,因此目的基因两侧被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端为,B正确;
C、经BamHⅠ处理后的质粒与用另一种限制酶BglⅡ处理得到的目的基因能连接起来,说明这两种酶切割获得的黏性末端相同,C错误;
D、限制酶和DNA连接酶作用的部位均为磷酸二酯键,D正确.
故选:C.

点评 本题结合图解,考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的原理及操作步骤,掌握基因工程各操作步骤中需要注意的细节,能结合图中信息准确答题,属于考纲识记和理解层次的考查.

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