Question

【题目】我国的卫生标准是每1000mL饮用水中大肠杆菌不得超过3个，在实验室里通常利用牛肉膏蛋白胨培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、H2O）对大肠杆菌进行纯化培养。回答下列问题：

（1）实验室中微生物纯化培养的最常见的方法是平板划线法和__________。平板划线法不适合用于微生物计数方法的原因是__________。

（2）大肠杆菌所需的碳源是来自培养基中的__________，NaCl的功能是__________。

（3）在牛肉膏蛋白胨固体培养基加入一定量的伊红美蓝，大肠杆菌在该培养基上的菌落特征是__________，这种培养基按其功能划分属于___________（填“选择”或“鉴别”）培养基。为了确定自来水中大肠杆菌是否超标，可以利用该培养基培养水样中的微生物，获取水样中大肠杆菌菌落的操作方法是__________。

Answer 1

【答案】稀释涂布平板法 划线起始处细菌密度大，经过培养，很可能长成一片，无法形成单菌落 牛肉膏和蛋白胨 为大肠杆菌提供无机盐，维持培养基的渗透压 菌落呈黑色 鉴别 用滤膜将1000mL自来水过滤，将滤膜放在伊红美蓝培养基上，在适宜条件下培养一段时间

【解析】

1、伊红为酸性染料，美蓝为碱性染料，大肠杆菌在伊红美蓝培养基上形成的菌落呈深黑色，并有金属光泽，伊红美蓝是专一鉴别大肠杆菌的指示剂。
2、常用的纯化微生物时的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。

（1）实验室中微生物纯化培养的最常见的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。由于平板划线法划线接种的起始处细菌密度大，经过培养，很可能长成一片，无法形成单菌落，所以平板划线法不适合用于微生物计数。

（2）培养基中的牛肉膏和蛋白胨可为大肠杆菌的生命活动提供碳源、氮源、维生素，NaCl能为大肠杆菌提供无机营养，维持培养基的渗透压。

（3）由于大肠杆菌的代谢产物会和伊红美蓝发生反应，使大肠杆菌的菌落呈现黑色，这种培养基按其功能划分属于鉴别培养基。用滤膜法也可计数水样中的大肠杆菌，其操作方法是用滤膜将1000mL自来水过滤，将滤膜放在伊红美蓝培养基上，在适宜条件下培养一段时间，可获得大肠杆菌的菌落。