题目内容
【题目】人类是乙型肝炎病毒的唯一宿主，现有的肝硬化、肝癌多从乙肝发展而来，接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法。乙型肝炎疫苗的研制先后经历了血源性疫苗和基因工程疫苗阶段。血源性“乙型肝炎疫苗”是取用乙肝病毒感染者的血液，用高速离心提纯血液中的乙肝病毒，之后再灭活，制成乙肝疫苗。基因工程乙肝疫苗的生产和使用过程如图1，图2示意大肠杆菌质粒的相关基因与限制酶切点；图3示意有关限制酶在DNA分子中的具体切点。请回答相关问题：
（1）从图1可知，该目的基因的具体功能是______________。
（2）选择大肠杆菌质粒作为运载体的原因是______________。
（3）用基因工程疫苗接种比血源性疫苗更安全，试从疫苗的结构特点解释原因:__________。
（4）形成有效的重组质粒，选择适当的限制性内切酶很重要。某学习小组根据图2和图3提出了三种方案：单独使用BamHⅠ、分别使用BamHⅠ和EcoRⅠ以及分别使用HindⅢ和EcoRⅠ，且认为选择使用BamHⅠ和EcoRⅠ最佳。该方案的优点是________________。如果选择使用HindⅢ和EcoRⅠ，则在构建重组质粒后，还需要运用_________技术以检测目的基因是否导入受体细胞。
【答案】 指导合成乙肝病毒外壳 ①对受体细胞无害；②具标记基因，能对重组DNA是否进入受体细胞进行鉴定；③在宿主细胞内能自我复制；④具有多个酶切位点，供外源基因插入其中 血源性疫苗需灭活破坏其核酸结构，灭活不成功则会导致接种者患乙肝，而基因工程疫苗仅有乙肝病毒外壳，不需要灭活 既防止了质粒发生自身环化和目的基因与质粒之间的反向连接，又便于筛选出含有目的基因（重组质粒）的受体细胞 DNA分子杂交（或核酸分子杂交、分子杂交）
【解析】
此题对比传统获得疫苗和通过基因工程获得疫苗的过程方法后重点强调了基因工程获得疫苗优点；图1表示的是通过基因工程获得疫苗和产生相应抗体的过程图，图2和图3表示进行重组质粒时对于限制酶的选取。
（1）根据图1形分析，通过基因工程技术奖目的基因导入大肠杆菌后获得了乙肝病毒外壳，说明目的基因的作用是指导合成乙肝病毒外壳。
（2）大肠杆菌的质粒作为运载体具备的条件有：①对受体细胞无害；②具标记基因，能对重组DNA是否进入受体细胞进行鉴定；③在宿主细胞内能自我复制；④具有多个酶切位点，供外源基因插入其中。
（3）血源性疫苗需灭活破坏其核酸结构，灭活不成功则会导致接种者患乙肝，而基因工程疫苗仅有乙肝病毒外壳，不需要灭活，因此用基因工程疫苗接种比血源性疫苗更安全。
（4）根据图形分析可知，选择两种不同的限制酶（HindⅢ和EcoRⅠ）分别切割目的基因和质粒，既防止了质粒发生自身环化和目的基因与质粒之间的反向连接，又便于筛选出含有目的基因（重组质粒）的受体细胞；在分子水平上，检测目的基因是否导入受体细胞常用DNA分子杂交发。
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