题目内容
(11分)Ⅰ、科学家将人的生长素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组,并成功地在大肠杆菌中得以表达。过程如下图,据图回答:
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(1)过程(1)表示的是采取____
____法来获取目的基因。
(2)图中(1)过程是以__ ____为模板,(2分)_______形成DNA单链,再进一步合成DNA双链。
(3)图中(2)所示为 ___ ___,它含有目的基因。[来源:]
(4)图中(3)过程用人工方法,使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内,主要是借鉴细菌或病毒________细菌的途径。一般将受体大肠杆菌用_________处理,以增大___ ____的通透性,使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。
(5)检测大肠杆菌B是否导入了质粒或重组质粒,可采用的方法是__ __
原理是:________________ 。
(6)如果把已经导入了普通质粒A或重组质粒的大肠杆菌,放在含有四环素的培养基上培养,发生的现象是___ _ ___ _;原理是:__________ __________
(1).反转录法(逆转录法) (2分)
(2).生长素基因转录来的信使RNA为模板(2分) 逆转录
(3).重组质粒
(4).侵染、CaCl2 细胞壁
(5).将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上,能够生长的,说明已导入了质粒A或重组质粒,反之则没有导入。因为普通质粒A和重组质粒上都有抗氨苄青霉素基因
(6).现象是:有的能生长,有的不能生长(2分) 原因:导入普通质粒A的细菌能生长,因为普通质粒A上有四环素抗性基因。导入重组质粒的细菌不能生长,因为目的基因正插在四环素抗性基因中,破坏了其结构和功能。
【解析】⑴是由合成人生长素的RNA得到人的生长素基因,所以是逆转录法,是以生长素基因转录来的信使RNA为模板,逆转录形成DNA,有图可知⑵是重组质粒,⑷⑸⑹主要考查目的基因导入受体细胞及检测的方法,详解见答案。
科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组,并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中,需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制性核酸内切酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC— ,限制性核酸内切酶II的识别序列和切点是—↓GATC—,据图回答:![]()
(1)过程①所需要的酶是 。
(2)在构建基因表达载体过程中,应用限制性核酸内切酶 切割质粒,用限制性核酸内切酶 切割目的基因。用限制酶切割目的基因和运载体后形成的黏性末端通过___________ 原则进行连接。人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组,原因是 。
(3)在过程③一般将受体大肠杆菌用_________处理,以增大 的通透性,使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。
(4)将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上得到如下图a的结果(黑点表示菌落),能够生长的细菌中已导入了 ,反之则没有导入;再将灭菌绒布按到培养基a上,使绒布表面沾上菌落,然后将绒布按到含四环素的培养基上培养,得到如图b的结果(空圈表示与a对照无菌落的位置)。与图b空圈相对应的图a中的菌落表现型是 ,这些细菌中导入了________________。
(5)人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达是因为 。写出目的基因导入细菌中表达的过程 。