Question

[生物——选修1：生物技术实践]（15分）

根据所学微生物的实验室培养和应用知识，完成下列问题。

(1)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有___________________ 、________和高压蒸汽灭菌。

(2)锥形瓶接种过程应在酒精灯火焰附近进行，防止________污染培养基。对无菌操作时用到的玻璃器皿要用________的方法彻底消灭其中的微生物，用酒精擦拭不能达到目的。

(3)稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的________稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到________的表面，进行培养。

(4)平板划线操作（如右图所示）时要做到以下几点：

①第一次划线及每次划线之前都需要对接种环进行 ________，待接种环冷却后才能伸入菌液，以免 ____________。

②划线时最后一区不要与第一区___________

③划线用力大小要适当，防止用力过大将____划破。

(5)土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们体内能合成________，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到徨化作用。统计样品中的分解尿素的活菌一般用________法，具体的操作流程是土壤取样→______→微生物的培养与观察 细菌的计数。

(6)统计的菌落往往比活菌的实际数目低，这是因为________________________________。

Answer 1

（除标注外，每空1分，共15分）（1）灼烧灭菌 干热灭菌

（2）瓶口的微生物 干热灭菌 （3）浓度梯度 琼脂固体培养基

（4）灼烧灭菌 温度太高杀死菌种 相交 培养基

（5）脲酶 稀释涂布平板 样品的稀释

（6）菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成，所以实际活菌数量要比测得的数量多（2分）

【解析】

试题分析：（1）实验室常用的灭菌方法有干热灭菌、灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌。

（2）接种时要通过火焰灼烧是为了防止瓶口的微生物污染培养基，对无菌操作的玻璃器皿要进行干热灭菌，防止微生物污染。

（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的浓度梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基上进行培养。

（4）第一次划线及每次划线之前都需要对接种环进行灼烧灭菌，以免被杂菌污染或残留有菌液，待接种环冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀灭菌种。划线时最后一区不要与第一区交叉，否则无法分离单个菌落。划线时用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。

（5）土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们体内能合成脲酶，酶起到的是催化作用，此酶在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用。统计样品中的分解尿素的活菌一般用稀释涂布平板法。具体的操作流程是土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察然后进行细菌的计数。

（6）因为菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成，所以实际活菌数量要比测得的数量多。

考点：本题考查微生物分离和培养相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。