Question

9．应用生物工程技术获得生物新品种或者生物制品是生物工程价值的体现，请回答下列有关生物工程的问题：

（1）目的基因克隆利用PCR技术，在此过程中，除需要加人ATP、酶、原料、模板外，还需要加人的物质是引物；
（2）图中将目的基因导人毕赤酵母菌前，需要用钙离子处理毕赤酵母菌，使其处于感受态细胞，然后再进行导入．基因表达载体导入与否可依据标记基因控制的性状是否出现来判断，该过程中分离纯化菌种的过程所利用的培养基具有选择作用．
（3）甲醇能诱导抗菌肽表达，可能与激活目的基因首端的启动子有关．检测目的基因是否翻译成蛋白质用抗原抗体杂交方法，而要进行个体生物学水平的鉴定，则需要将基因工程产品活性鉴定以确定其活性．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）目的基因克隆利用PCR技术，在此过程中，除需要加入ATP、酶、原料、模板外，还需要加如的物质两种不同的引物；
（2）将目的基因导入微生物细胞的常用的方法是感受态细胞法，故将目的基因导人毕赤酵母菌前，需要用钙离子处理毕赤酵母菌，使其处于感受态细胞，然后再进行导入．基因表达载体导入与否可依据标记基因控制的性状是否出现来判断，如具有抗某种抗生素的特性等，该过程中分离纯化菌种的过程所利用的培养基具有选择作用．
（3）甲醇能诱导抗菌肤表达，可能与激活目的基因首端的启动子有关．检测目的基因是否翻译成蛋白质用抗原抗体杂交方法，而要进行个体生物学水平的鉴定，则需要将基因工程产品提取出来进行活性鉴定以确定其活性．
故答案为：
（1）PCR  引物 
（2）钙离子  感受态细胞  标记基因  选择 
（3）启动子  抗原抗体杂交  活性鉴定

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤的相关细节，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．