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15.科学家通过基因工程的方法,能使大肠杆菌产生人的胰岛素.以下叙述错误的是(  )
A.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
B.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达
C.DNA连接酶和限制性内切酶都是构建重组质粒必需的工具酶
D.目的基因的检测与表达过程中没有发生碱基互补配对

分析 1、基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成.
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等.
(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法.
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等.
2、基因工程的工具:
(1)限制酶:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂.
(2)DNA连接酶:连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键.
(3)运载体:常用的运载体:质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒.

解答 解:A、标记基因一般是抗生素抗性基因,因此可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒,A正确;
B、目的基因导入受体细胞后,在受体细胞中不一定能成功表达,B正确;
C、构建重组质粒必需的工具酶是限制酶和DNA连接酶,C正确;
D、目的基因的检测(DNA分子杂交技术、分子杂交技术等)与表达(包括转录和翻译两个步骤)过程中都发生了碱基互补配对,D错误.
故选:D.

点评 本题考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤,掌握各步骤中的细节问题,能结合所学的知识准确判断各选项,属于考纲识记和理解层次的考查.

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