Question

回答下列有关生物工程的问题．
下表是基因工程中几种限制酶识别序列及其切割位点；图2是转基因香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点．

（1）图1是用限制酶

 

进行切割得到的目的基因，可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后

 

．
（2）从图2中反映质粒作为运载体的特点是

 

．基因工程中还可以用

 

作为运载体．
（3）图2中构建重组质粒不能使用SmaI酶切割的原因是

 

．
（4）图2中④表示组织培养过程中的

 

，它对植物激素调节的要求是

 

．
（5）图2中的农杆菌是基因工程中的

 

．判断该转基因工程是否成功的依据是

 

．

Answer 1

考点：基因工程的应用

专题：

分析：分析题图：含目的基因的DNA和质粒上均有salⅠ、HindⅢ、BamHⅠ、EcoRⅠ酶切位点，但SmaI酶切位点位于目的基因和标记基因上，切割会破坏目的基因，EcoRⅠ酶切割质粒自身环化，用BamHI 和HindⅢ酶对外源DNA和质粒进行切割．图中①是构建基因表达载体；②③是利用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞；④和⑤表示植物组织培养，原理是香蕉组织细胞具有全能性，其中④表示脱分化，⑤表示再分化，培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加生长素和细胞分裂素．

解答： 解：（1）构建含目的基因的重组质粒A时，选用 BamHI 和HindⅢ酶对外源DNA和质粒进行切割，这样使目的基因两端的黏性末端不同，可以防止含目的基因的外源DNA片段自身环化，同理，也可以防止质粒自身环化．
（2）质粒作为运载体的特点是有多个酶切位点、有标记基因、能在宿主细胞内复制并稳定保存；还常用噬菌体或动植物病毒（或病毒）作为运载体．
（3）质粒抗生素抗性基因为标记基因，由图可知，标记基因和外源DNA目的基因中均含有SmaI酶切位点，都可以被SmaI酶破环，故不能使用该酶剪切质粒和含有目的基因的DNA．
（4）图2中④表示组织培养过程中的脱分化，植物激素调节的要求是生长素与细胞分裂素浓度的比值约为1．
（5）图2中的农杆菌是基因工程中的含目的基因的受体；判断该转基因工程是否成功的依据是该目的基因在香蕉中是否成功表达．
故答案为：（1）BamH I和Hind III    自身环化
（2）有多个酶切位点、有标记基因、能在宿主细胞内复制并稳定保存（至少写2点）噬菌体或动植物病毒（或病毒）
（3）SmaI酶会破坏目的基因和质粒
（4）去分化    生长素与细胞分裂素浓度的比值约为1
（5）含目的基因的受体       该目的基因在香蕉中是否成功表达．

点评：本题考查基因工程和植物细胞工程的相关知识，意在考查学生对基因工程的相应知识的理解能力及在较复杂情景中综合运用相应知识进行分析、判断、推理和评价的能力．