6．据报导，苏州大学农业科技学院的科研人员通过基因重组法，将国内外原始的优良彩色茧基因转移到高产优质白色茧品种中，选育出高产彩色茧新品种。第一批10张天然彩色茧蚕种已于2003年11月底在中国华源集团江苏新沂基地喜获丰收，一张种产茧量超过40kg。淡绿、橘黄、浅红、金黄……用这些天然彩色蚕茧丝无需染色而织成的色彩斑斓的绸缎，兼具华美外观和环保内质，深受人们的喜爱。若设高产有关基因为A，白色蚕有关基因为b，优良彩色蚕有关基因为c。(注：题中所指的品种均为纯种)

(1)将优良彩色蚕基因导入到高产优质白色蚕品种的受精卵中，所获得的重组细胞，基因型可表示为__________，由该受精卵发育而来的个体能否稳定遗传? __________。如伺获得能稳定遗传的高产彩色蚕新品种?　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　。

(2)从概念上分析，这种基因重组与孟德尔基因自由组合所产生的基因重组有何不同?(至少两个方面)

　__________________________________________________________________________________________。

5.下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。

(1)　　　　　　　　　　　　　　 技术是单克隆抗体技术的基础。

(2)在图中HAT培养上，未有融合的________和融合的_________ 都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长。

(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最主要的优点是　　　　　　　　　 _________　 。

(4)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的迅速　　　　　 特点，又具备淋巴细胞的_________　　 特点，经过选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行______________和___________，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。最后将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或小鼠腹腔内增殖，从________________或________________中，就可以提取出大量的单克隆抗体了。

(5)淋巴细胞是由动物体　　　　　 中的　　　　　 细胞分化、发育而来。

4、下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：

(1)图甲和图乙所示的过程中，都必须用到的动物细胞工程技术手段是__________。

(2)图甲中②过程常在___________诱导下完成，④过程与体外培养相比，其优点是_________________。

　(3)单克隆抗体能定向攻击癌细胞，主要是利用其_____________________________________________。

(4)若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像白面绵羊吗?______。原因是_______________________。

(5)图乙过程的技术具有多种用途，但是不能　　 (　　 )

A．有选择地繁殖某一性别的家畜　　　　 B．繁殖家畜中的优良个体　

C．用于保存物种　　　　　　　　　　　 D．改变动物的核基因

2．根据模拟制作重组DNA分子的活动，甲DNA分子、乙DNA分子被EcoRI酶切后，即可获得所需的目的基因和质粒，回答以下问题：

(1)绿色硬纸板(甲DNA分子)的碱基序列为：　　　　 红色硬纸板(乙DNA分子)的碱基序列为：

　 ……ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATAC……　　　　 ……TCCTAGAATTCTCGGTATGAATTCCATAC……

　 ……TATCGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATG……　　　　 ……AGGATCTTAAGAGCCATACTTAAGGTATG……　　　

其中，　　　　　 　DNA分子含有“目的基因”，　　　　　 　DNA分子是“质粒”。

　 (2)用剪刀代表进行切割。酶切位点在　　　　 　(a处还是b处)，此化学键称为　　　　　　 　。

请用“||”在甲、乙两DNA分子上标出EcoRI的作用位点。

(3)你模拟插入的DNA片断能称得上一个基因吗？　　　　　　　　 　。

EcoRI属于　　　　　　　　 　酶。

(4)从基因文库中获取目的基因是常用方法，基因文库实际上就是指导入了某种生物不同基因的许多DNA片断的　　　　　　　　　　　　 　的群体。按照其中所含基因的量又可分

为　　　　　　　 　文库和　　　　　　 　文库。

　 3．中科院上海植物生理生态研究所在“神舟四号”飞船进入太空后为一对“新人”--黄花烟草原生质体和革新一号烟草原生质体举办了特殊的“婚礼”。将两个“新人”放入融合器中，当充满液体的融合器加上直流电场，两个原本相互游离的细胞一下子贴到一起，开始了“窃窃私语”。紧接着，在瞬间高压脉冲的作用下，细胞膜被击出了一个小孔，透过这微小的空间，两股细胞质展开了“心灵沟通”。渐渐地，细胞核也扭摆着“亲热”起来，20min后，它们俩已是你中有我，我中有你，一个新生命就这样诞生了。地面实验结果显示：用于融洽的两个“新人”，一个开的是粉花(标记为“一号”)，一个开的是黄花(标记为“二号”)融合后的细胞再生植株开的是黄花，但形状却和一号相同(称“一号形状”，另一个称“二号形状”)。这种“太空烟草”比普通烟草个子矮，株秆粗，烟叶多，是我国太空育种试验的一项重大成果。据此回答下列问题：

(1)由于细胞的密度不同，因此在地面上进行细胞融合非常困难。从理论上讲，在太空中细胞更容易融合，可能的原因是　　　　　　　　　　 。在显微镜下观察，“新人”的细胞膜融合在一起，使细胞呈圆球状，这是因为膜具有　　　　　　　　　　 特性。“细胞婚礼”中用到的诱导融合技术是　　　　　　　　　　 。

(2)两种烟草原生质体融合时，　　　　　　　　 类型是要被淘汰的。　　　　　　　　　　 类型是我们需要的，这样的细胞经组织培养后，再生的植株属　　　　　 倍体。

(3)植物体细胞融合技术与传统的有性杂交相比，其优点是　　　　　　　　　　　　　　　 。

(4)“太空烟草”能稳定遗传吗？为什么？　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

1．将人的抗病毒干扰素基因“嫁接”到烟草的DNA分子中，可使烟草获得抗病毒的能力，形成转基因产品。请分析回答：

(1)烟草转基因产品的获得属于(　　 )。

A．基因工程　　　 B．细胞工程　　 C．发酵工程　　　　 D．酶工程

(2)人的基因之所以能接到植物中去，原因是_________________________________。

(3)烟草具有抗病毒能力，说明烟草体内产生了________________________________。

(4)不同生物间基因移植成功，说明生物共用一套_______，从进化的角度看，这些生物具有_______________。

(5)烟草DNA分子被“嫁接”上或“切割”掉某个基因，实际并不影响遗传信息的表达功能。这说明__________。

(6)该工程用于实践，将给农业、医药等许多领域带来革命，目前己取得了许多成就，请你列举你所知道的或你所设想应用该工程的两个具体实例。____________________________________。

(7)有人认为，转基因新产品也是一把双刃剑，如水能载舟也能覆舟，甚至可能带来灾难性的后果，你是否支持这一观点？如果支持，请你举出两个可能出现的灾难性后果的实例。

_______________________________________________________________。

(8)有人提出“吃基因补基因”，你是否赞成这种观点，试从新陈代谢的角度简要说明理由。

39．(现代生物科技专题，10分)

(现代生物科技专题，10分)

右图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp^R为青霉素抗性基因，tct^R为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。

(1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有　　　　　　 　　　　　　、　　　　　　　　　　　　 、　　　　　　　　　　 三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行　　　　　　　　　 。

(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是　　　　　　　　　 ；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是　　　　　　　 。

(3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是　　　　　　　 ，其合成的产物是　　　　　　 。

(4)在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是　　　　　　　　　　　 。

38. (生物技术实践，10分)

生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源。我国利用农作物废弃物(秸秆)生产乙醇，其技术流程为：纤维素酶解→酵母发酵→蒸馏→成品。

(1)纤维素酶的成本能否下降，是能否实现乙醇工业化生产的关键因素。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。

① 最好选择怎样的环境采集土样？

② 以下是一种培养基配方：纤维素粉5g、NaNO3 1g、Na2HPO4·7H2O 1.2g、KH2PO4 0.9g、MgSO4·7H2O 0.5g、KCl 0.5g、酵母膏0.5g、水解酪素0.5g(蒸馏水定容到1000mL)。该培养基能够增加样品中纤维素分解菌的浓度，其原理是____________。

③为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入__________染液，将筛选获得的菌液稀释后用　　　　　　 方法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生　　　　　 的菌落作为菌种进行扩大培养。

④ 纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量如何呢？请设计实验进行检测。

(2)进行工业化酶解时，为了使纤维素酶能反复使用，可以采用　　　　 技术。

(3)乙醇是酵母菌的发酵产物。发酵时酵母菌直接利用的物质是　　　　　 。

(4)发酵时乙醇浓度升高会对酵母菌产生毒性，从而影响进一步的发酵。科学家利用基因工程方法创造出一种对乙醇浓度有高耐受力的酵母菌新菌种，该过程需采用PCR技术扩增目的基因。与体内DNA复制相比，PCR反应体系需加入哪两种特别的物质？

38、39题为选做题。考生只能选做一题。

37.(8分)菲尔和梅洛因发现了RNA干扰现象(RNAi)，获得了2006年诺贝尔生理学或医学奖。DNA干扰的机制如下：双链RNA一旦进入细胞内就会被一个称为Dicer的特定的酶切割成21-23个核苷酸长的小分子干涉RNA(SiRNA)。Dicer酶能特异识别双链RNA，以ATP依赖方式切割由外源导入或者由转基因．病毒感染等各种方式引入的双链RNA，切割产生的SiRNA片断与一系列酶结合组成诱导沉默复合体(RISC)。激活的RISC通过碱基配对结合到与Si RNA同源的mRNA上，并切割该mRNA，造成蛋白质无法合成(如下图所示)。请回答下列问题：

(1)组成双链RNA的基本单位是___________________________。

(2)根据RNAi机理，RNAi能使相关基因”沉默”，其实质是遗传信息传递中的________过程受阻。

(3)根据上图信息，诱导沉默复合体(RISC)要使基因“沉默”，条件是RISC上有_________________________________________。

(4)有科学家将能引起RNA干扰的双链RNA的两条单链分别注入细胞，结果却没有引起RNA干扰现象，请据图分析最可能的原因是________________________________。

(5)研究发现，某基因上碱基的改变可能会导致生物性状的变异。若有一亲代DNA上某个碱基对发生改变，而其子代的性状并未发生改变，可能的原因是(至少三种)？

_________________________________________________________________________

___________________________________________________________________________。

36.(14分)香猪肉嫩味香，无膻无腥，是苗族人民将野猪长期驯化培育而成的珍贵品种。其背部皮毛颜色由位于不同常染色体上的两对基因(Aa和Bb)控制，共有四种表现型，黑色(A　 B　 )、褐色(aaB　 )、棕色(A 　bb)和白色(aabb)。据新华社电，韩国科学家2007年12月27日宣布，他们在世界上首次利用成功率更高的干细胞克隆技术将香猪培育成适合人体器官移植的“迷你猪”。与传统的体细胞克隆技术不同，韩国科学家这次从猪骨髓中提取干细胞，经处理后，移植入卵子，形成“受精卵”，成功使母猪怀孕。

(1)小香猪是长期　　　　　　 的结果。如何通过实验判断野猪与小香猪是否同一物种？

　　　　　　　　　　　　　　　　 。产生“迷你”克隆猪的过程属于　　　　　 生殖。“迷你猪”适合移植的最可能理由是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(2)假设一只雄性小香猪患有由线粒体DNA缺陷引起的疾病，当它与正常的小香猪交配后，其后代患病的概率应为　　　　　　 。

(3)若右图为一只黑色小香猪(AaBb)产生的一个初级精母细胞，此

细胞中1个染色体组含有　　　　　 条染色体。如不考虑交叉互换，

1个初级精母细胞产生的精子类型有　　　　　 种。

(4)有多对黑色杂合的小香猪，要选育出纯合的棕色小香猪，

请简要写出步骤(假设亲本足够多，产生的后代也足够多)。

　　 ①　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

②　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(5)已知小香猪的一种隐性性状由单基因(h)控制，但不知控制该性状的基因(h)是否位于常染色体上，请你设计一个简单的调查方案进行调查，并预测调查结果。

方案：①寻找具有该隐性性状的小香猪进行调查；

　　 　 ②　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

结果：①　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

　　 　 ②　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

　　　 ③　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。