32.(8分)动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。
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(1)肝脏切成小薄片,这有利于肝脏细胞 ▲ 。
(2)气室中充入5%C02:气体的主要作用是 ▲ 。
(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长,但要注意选择抗生素的 ▲ ,以保证抗生素对肝脏无害。
(4)有机物X有毒性,可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具,探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。
材料用具:
肝脏小块,外周血淋巴细胞,淋巴细胞培养液,植物凝集素(刺激淋巴细胞分裂);显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿,滴管;吉姆萨染液(使染色体着色),有机物X溶液等。实验过程:
①在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞,取4等份,备用。
②利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置,按下表步骤操作(“√”表示已完成的步骤)。
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甲 |
乙 |
丙 |
丁 |
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步骤一:加人肝脏培养液 |
√ |
√ |
√ |
√ |
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步骤二:加入有机物X溶液 |
√ |
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√, |
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步骤三:放置肝脏小块 |
√ |
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上表中还需进行的操作是 ▲ 。
③培养一段时间后,取4组装置中的等量培养液,分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。
④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察 ▲ ,并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常,而甲组的淋巴细胞正常,则说明 ▲ 。
31.(6分)酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对
细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛(以植物为
食)消化腺中提取;果胶酶、纤维素酶从微生物中提
取。为了研究不同酶液的酶解效果,某实验小组取无
菌烟草幼叶,切成相同大小的小片,等量放入6支试
管中,试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。
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试管编号 项目 |
I |
Ⅱ |
Ⅲ |
Ⅳ |
V |
Ⅵ |
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蒸馏水(mL) |
2 |
0 |
1 |
1 |
1 |
1 |
|
缓冲液(mL) |
0 |
2 |
1 |
0.5 |
0.5 |
0.5 |
|
果胶酶液(mL) |
0 |
0 |
0 |
0.5 |
0 |
0 |
|
蜗牛酶液(mL) |
0 |
0 |
0 |
0 |
0.5 |
0 |
|
纤维素酶液(mL) |
0 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0.5 |
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实验结果 (绿色深浅程度) |
- |
- |
- |
+++ |
++++ |
++ |
(注:“+”越多表示绿色越深,“一”表示颜色无显著变化)
(1)实验过程中,需要轻摇试管,其目的是 ▲ ,使原生质体从叶小片中游离出来,以便观察悬浮液绿色的深浅。
(2)从绿色的深浅可推测:蜗牛酶液酶解效果最好,原因是蜗牛酶液含有 ▲ 等多种酶。该实验中 ▲ 是空白对照组,其设置意义是 ▲ 。
(3)用网筛过滤原生质体到离心管内,离心后收集沉淀物,并用 ▲ 洗涤。(4)原生质体是否符合要求还需进行检验,其检验的方法是 ▲ 。