2．我国植物学家将名贵兰花的茎尖细胞放进培养基中进行培养，最终发育成完整的新植株。下图是细胞培养形成兰花植株示意图，请根据图回答：(注：胚状体即等同于植物种子的胚的结构。)

(1)过程④由愈伤组织形成胚状体要经过___　 __和_____过程，⑤过程主要是指　　 __。

(2)在培养过程中，除了提供水分和必要的有机营养物质外，还需要在培养基中加入______________和____________。同时，培养过程中，除保证必要的温度、光照和氧气等外界条件外，还必须保证的关键条件是________________________。

(3)一个兰花茎尖在一年之内可以生产出400万株兰花苗，与有性生殖相比，植物组织培养的优势主要体现在_________________　 ______和____________________________。

(4)与植物组织培养的培养基相比，用于动物细胞培养的培养液除含有水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸等之外，通常还要添加　 　　　　　　　　。

1．下图为细胞融合的简略过程，请据图回答：

(1)若A、B是植物细胞，在细胞融合之前须处理获得原生质体，由A、B到细胞C的过程中，常用的促融剂是__________________。融合完成的标志是_____________。

(2)若A、B是植物细胞，则形成的D细胞还要应用____________技术把D培养成植株。

(3)在组织培养培养过程中，除了提供水分和必要的有机营养物质外，还需要在培养基中加入___　 __和___　　 _。同时，培养过程中，除保证必要的温度、光照和氧气等外界条件外，还必须保证的关键条件是_____ __________。

(4)若A、B是动物细胞，一般取自_____________，然后用_____________使其分散开来；由A、B到C的过程中，常用的且不用于植物细胞融合的手段是________________。A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有______________________________。

(5)若该过程是制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，两两融合所形成的C有_ _种，用来培养的D细胞应该是_____，获得D后，常用的培养方法是培养液中培养和 　　__。

(6)由A、B两种细胞人工融合成C细胞的过程中，常用　　　 　　　　作为诱导剂。融合过程包括　　　 　　　和　　 　　　　　两方面，D细胞称为　　　　 　　　　细胞。

(7)若A、B细胞为植物细胞，那么这些细胞已经用酶降解脱掉　　　　　　 。这种酶可能是　　　　 ，由此生成的A和B细胞称为　　　　 。若由D细胞培育成植株，可用 　　　　　　技术，这一培养过程要经过　　　 　　　和　　 　　　　两个阶段。目前，植物体细胞杂交还有许多理论和技术问题没有解决，如杂种植物还不能按照人们的需要表现出亲代的优良性状，从遗传学角度分析，其内在因素很可能是　　　 　　　　　。

(8)若A细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为B淋巴细胞，那么D细胞称为　 　　　　　　，由D细胞连续分裂产生大量细胞的过程，称为　 　　　　　　过程。这种细胞既能无限繁殖，又能产生　　　 　　　　　　。

(9)若A为人细胞，B为鼠细胞，并分别用红、绿荧光染料标记细胞膜上的蛋白质，在C细胞时，细胞一半发红色荧光，一半发绿色荧光。到D细胞阶段，两种颜色的荧光匀分布，请解释原因：　　　　　　　　　　　　　　　 。

6．1999年4月23日9时，在广州中山医科大学第一附属医院出生一健康女婴，她是我国首例第三代试管婴儿，父母身体健康。婴儿的母亲7年前生下一男婴，孩子一岁后发病，最后死于脑出血；5年后，她第二次怀孕6个月时，到医院抽羊水及脐带血诊断，发现胎儿是男孩，而且是血友病患者，遂引产。夫妇二人最后来到中山医科大学附属医院做试管婴儿。医生培养了7个可做活体检查的胚胎，并抽取每个胚胎1-2个细胞进行检查后，选择了两个胚胎进行移植，最后一个移植成功。根据此资料回答下列问题：

(1)试管婴儿技术作为现代生物技术与母亲正常怀孕、生产的过程相同之处是_____ __，不同点在于__________

(2)血友病的遗传方式为_______．如果用B-b表示血友病基因或正常基因。则其父、母亲的基因分别是__ __和____ 。如果该夫妇再生一男孩，患血友病的概率是__________。

(3)医生抽取活体胚胎的1-2个细胞后，可通过观察__________判断早期胚胎的性别，你认为医生应选用__________性胚胎进行移植，原因是__________。应用现代生物技术．现在人们已能够选取最理想的胚胎，其基因型应该是__________。自然状态下，出现这样胚胎的概率是__________。该实例体现了现代科学技术应用于社会和人类生活的重要意义。

1(1) 基因工程　　 植物体细胞杂交　 (2)脱分化 　　再分化　

(3)(土壤农杆菌的)质粒　 　编码区是连续的(或没有内含子)　　

目的基因和运载体结合　　　 将目的基因导入受体细胞　　 　

(4)实现遗传物质的定向改变、克服了远源杂交不亲和的障碍(和周期短)

2(1)启动子　 受精卵　 转基因(或成熟)(2)限制性内切酶　 DNA连接酶　 用相同的限制性内切酶催化反应后形成了互补碱基序列(或不同生物DNA的结构具有统一性)

(3)

(4)分子检测；DNA分子杂交；DNA与mRNA分子杂交；或抗原抗体杂交；从羊的乳汁中提取干扰素(以上任意任出两点即可)

(5)将人的T淋巴细胞与小鼠的瘤细胞在体外融合，筛选出既能产生干扰素又能无限增殖的杂交瘤细胞，然后在适宜条件下进行细胞培养

3(1)胰岛素　 胰岛B　 (2)B　 (3) ①质粒　 目的基因(或胰岛素基因)　 重组质粒　 受体细胞(或大肠杆菌)　 ②人工合成　 ③同一种限制性内切酶

4(1)造血干细胞　 (2)病毒　　 腺苷脱氨酶基因　　 T淋巴细胞　　

(3)限制酶　 DNA连接酶　　 运载体　 (4)脱氧核苷酸排列顺序不同

(5)X^hX^h　 X^hX^h　 (6)C (2分) 在基因治疗过程中，只是在患者的造血干细胞内导入正常基因，其它的体细胞(包括卵原细胞)中仍存在成对的血友病基因，所形成的配子中，都带有血友病基因，因此该女子与正常男子结婚，其后代中儿子全部患病、女儿全部正常。其它答案合理也可得分(3分)

5(1)水　 　 无机盐　 无菌(2)生长素 　 细胞分裂素　　 (3)叶绿体 　 (4)24

(5)AB、Ab、aB、ab (6)单倍体　　 用秋水仙素处理幼苗　 (7)植物的组织培养

6(1)都通过有性生殖产生，在母体子宫内发育形成胎儿　　 受精作用在体外，并在体外发育成早期胚胎后进行胚胎移植　 (2)伴X隐性遗传　 X^BY 　X^BX^b　 　1／2

(3)染色体组成　　 女　　 男性胎儿从母亲获得b基因，患病可能为50%，女性正常　 X^BX^B 　1／4

5．下图表示水稻(体细胞有24条染色体)的花药通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下形成试管苗的培养过程，已知水稻的基因型为AaBb。

(1)愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成的不规则的细胞团，在愈伤组织形成过程中，必须从培养基中获得　　和　　及小分子有机物等营养物质，在培养过程中需要严格控制　　　　　 条件

(2)要促进花粉细胞分裂和生长，培养基中应有　　　和　　　两类激素。

(3)愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根，再发育成具根、茎和叶的植物体。这一过程必须给予光照，其原因是　　　利用光能制造有机物，供试管苗生长发育。

(4)试管苗的细胞中含有　　　　 　条脱氧核苷酸链。

(5)培育出的试管苗可能出现的基因型有　　　。

(6)这种利用花药离体培养成的试管苗属于　体。要使它繁殖后代必须采取的措施是　　　。

(7)从细胞工程角度看这种育种方法叫　　　　 　　。

4．1990年，在经过了长期的审查后，美国NIH(美国国立卫生研究所)终于批准了对一名患有严重复合型免疫缺陷症的4岁女孩实施基因治疗。腺苷酸脱氨酶是免疫系统完成正常功能必需的酶，临床患者先天腺苷酸脱氨酶(ada)基因缺乏，导致她患重症联合免疫缺陷病(SCID)。因此，她不能抵抗任何微生物的感染，只能在无菌条件下生活。运用现代生物技术进行治疗后，患者的免疫功能得到了很大的修复。下图表示治疗SCID的过程，据图回答下列问题：

(1)T淋巴细胞由　　　　　 在胸腺中发育成熟。

(2)在这个实例中充当“分子运输车”的是　　　　　 ，目的基因是　　　　　　 ，目的基因的受体细胞是　　　　　 　　 。

(3)要获得携带人正常ada基因的细菌，需要的工具包括　 　　 、　　　 、　　　 。

(4)人的ada基因与胰岛素基因相比，其主要差别是　　　　　 。

(5)如果科学家通过基因工程技术，成功改造了某女性血友病患者的造血干细胞，使其凝血功能全部恢复正常。写出该女性在治疗前后的基因型：(正常基因为H，血友病基因为h)　 　　　、 　　　。

(6)如果该女性在恢复正常后，与一正常男性结婚，所生子女的表现型为　　 (在下列选项中选择正确的一项)，并说明理由：　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

A．子、女儿全部正常　　　　　　　 B．儿子、女儿中各一半正常

C．儿子全部患病、女儿全部正常　　 D．儿子全部正常、女儿全部患病

3．糖尿病是一种常见病，且发病率有逐年增加的趋势，以致把它列为第三号“杀手”。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

(1)目前对糖尿病Ⅰ型的治疗，大多采用激素疗法，所用激素为__　　 __，由__　　 __细胞分泌。

(2)让一健康人和糖尿病患者于空腹时同时口服葡萄糖，服用量按每人每千克体重1克计算，随后每隔一段时间，测定各人的血糖浓度，如右图所示，图中表示糖尿病患者的曲线是_______。

(3)这种治疗用的激素过去主要是从动物的内脏中提取，数量有限，20世纪70年代后，开始采用基因工程的方法生产，如图所示，请回答：

①指出图中2、4、6、7的名称:　　　 　　　　　　　　　　　

2_________　　　　　　 ____，

4_____　　　　　　 ________，　

6_________　　　　　　 ____，

7__________　　　　　　 ___。

②一般获取4采用的方法是_____________。

③6的获得必须用___　　　　　　　　 _切割3和4，它们产生相同的黏性末端，再加入适量的DNA连接酶，才可形成。　　　　　　　　　　　　　　

2．干扰素是能够抑制多种病毒复制的抗病毒物质。科学家利用基因工程技术从人的T淋巴细胞中提取干扰素基因转入羊的DNA中，培育出羊乳腺生物发生器，使羊乳汁中含有人体干扰素。请回答：

(1)科学家将人的干扰素基因与乳腺蛋白基因的____________等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法，导入哺乳动物的___________细胞中，然后，将该细胞送入母体内，使其生长发育成为　　　　　　 动物。

(2)在该工程中所用的基因“剪刀”是　　　　　　　　　 。将人体干扰素基因“插入”并连接到羊体细胞DNA上所需要的酶是　　　　　　 　　　　　。人体干扰素基因之所以能“插入”到羊的DNA内，原因是　　　　　　　　　 。

(3)请在下框中画出某DNA片段被切割形成黏性末端的过程示意图。

(4)如何检测和鉴定人的干扰素因素已被成功导入羊体内？请写出两种方法：

　　　　　　　　　　　　　　　　 、　　　　　　　　　　　　　　　 。

(5)为了使T淋巴细胞在体外产生大量的干扰素，有人进行了实验，可是当将T淋巴细胞在体外培养繁殖了几代后，细胞分裂就停止了。请你用细胞工程的方法，以小鼠为实验对象，提出一个既能使T淋巴细胞在体外培养繁殖，又能获得大量小鼠干扰素的实验设计简单思路:

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 ____　　　 ___　

1．下图所示为农作物新品种的育种方式：

(1)图示育种方式涉及到的生物工程技术有___________、____________。

(2)②③过程分别称为__________、____________。

(3)⑤过程中常用的运载体是_______，与上述农作物相比，该抗虫基因的结构特点是_____。⑤过程表示的基因操作步骤是__________、___________。

(4)上述育种与传统杂交育种相比，具有的突出优点是__________。(4分)

7．为扩大可耕地面积，增加粮食

产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受

关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐

盐水稻新品系。

(1)获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的　　　 处，

DNA连接酶作用于　　 　　处。(填“a”或“b”)

(2) 将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和　　　　　 　法。

(3)由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用　　　　　　　　 技术。该技术的

核心是　　　　　　　　　 和　　　　　　　　　 。

(4)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的　 　　　　作探针进行分子杂交检测，又要用　　　　 　　　方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。

1(1)(自然选择)农药对害虫的抗药性变异进行了选择(2)基因工程 抗虫基因的获取　 基因表达载体的建构　 目的基因导入受体细胞　 目的基因检测和鉴定(3)限制性核酸内切酶(限制酶)　 DNA连接酶　　 运载体(4) 减少农药用量　　 减轻环境污染

2(1)它们共用一套遗传密码 (2)农杆菌转化法　　 DNA分子杂交技术(3)基因突变　

(4)克服远缘杂交不亲和性(或能有效地打破物种的生殖隔离界限)(5)将目的基因导入叶绿体基因组或线粒体基因组中

3 (1)8 　　GCC　 转录和翻译　　 (2)基因突变　 DNA的碱基序列(或基因结构)

(3)离体条件，需要高温，高温酶(答上两项即给分)　 (4)3069(2分)

4(1)逆转录 (2)DNA连接　 载体　 S基因(3)复制 　合成S基因的mRNA(4)大肠杆菌中表达的S蛋白 　SARS康复病人血清(5)相同　 　表达蛋白质所用的基因相同

5(1)限制性内切酶和DNA连接酶(2)具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保存　 (3)卡那霉素(4)放射性同位素(或荧光分子)标记的抗虫基因(5)①非转基因植株　 ②3：1　 ③100

6(1)耐高温　 2)引物对B　 (3)否　 (4)农杆菌　 (5)①2　 ②1

7(1)a　　 a　 (2)基因枪法(花粉管通道法)(3)植物组织培养(1分)　 脱分化(去分化)　　 再分化(4)耐盐基因(目的基因)　　 一定浓度的盐水浇灌(移裁到盐碱地中)

6．将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。

请根据以上图表回答下列问题。

(1)在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是　　　　　　　　　　　　　 。

(2)PCR过程中退火(复性)温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？__________。

(3)图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？　 　　　。

(4)为将外源基因转入马铃薯，图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为　　　　　　　 。

(5)对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。

①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到_________种DNA片断。

②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，得到_________种DNA片断。