Question

【题目】小明欲从土壤中分离尿素分解菌，请回答下列问题：

(1)分离并计数尿素分解菌时，需要配制以尿素为唯一氮源的__________ (填“固体选择”“液体鉴别”“固体鉴别”或“液体选择”)培养基。

(2)选取10g土样后进行一系列稀释，分别吸取0.1mL的104、105、106倍稀释的菌液在灭菌板上进行__________接种，接种前至少要准备__________个灭菌平板。实验结果显示：106倍稀释的菌液对应平板上的菌落数为124、118、109，则每克土样中的活菌数为________个。

(3)其他同学认为小明的实验结果偏大，可能原因是操作出现错误。为了排除其他同学的质疑，你给小明的建议是______________________________。

(4)为了鉴定分离出来的菌种是否为尿素分解菌，需要在以尿素为唯一氮源的培养基中加入__________，根据颜色变化判别。

Answer 1

【答案】固体选择 涂布 10 1.17×108 选取同样的土样重复实验，吸取菌液时注意充分摇匀，若两次实验的结果基本相同，则说明没有出现操作错误 酚红指示剂

【解析】

微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等，常用的灭菌方法主要有高压蒸汽灭菌法、灼烧灭菌法和干热灭菌法。常用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法，其中稀释涂布平板法可以用来进行微生物的计数，酚红指示剂可以检测尿素分解菌，刚果红染液可以鉴定纤维素分解菌。

（1）分离尿素分解菌需要配制以尿素为唯一氮源的固体培养基，属于选择培养基。

（2）对细菌的分离和计数要采用 稀释涂布平板法。每个稀释倍数的菌液都要涂布3个平板，即104、105、106倍稀释的菌液要涂布9个平板， 另外还需要准备1个空白平板作为空白对照，所以至少需要准备10个灭菌平板。每克土样中的活菌数为 （124+118+109）÷3×0.l×106 ×10=l.17×108（个）。

（3）其他同学认为该同学的实验结果偏大，可能原因是操作出现错误，即可能涂布时吸取了下层的菌液，导致活菌数偏多。为了排除其他同学的质疑，该同学应该选取同样的土样重复实验，吸取菌液时注意充分摇匀，若两次实验的结果基本相同，则说明没有出现操作错误。

（4）鉴别尿素分解菌可以选用以尿素为唯一氮源且添加了酚红指示剂的鉴别培养基。