Question

【题目】苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒蛋白．如图是转Bt毒蛋白基因植物的培育过程示意图（amp′为抗氨苄青霉素基因），①～④表示过程．请据图作答：

（1）由HindⅢ酶切后，得到的DNA片段的末端碱基序列是__．

（2）将图中①所示的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，产生__种DNA片段，②过程可获得__种重组DNA．如果只用BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得__种重组DNA．

（3）该过程中Bt毒蛋白基因插入Ti质粒后，不应影响质粒的__．

A．复制 B．转录 C．碱基对的数量D．抗性基因的表达

（4）用农杆菌的Ti质粒作运载体，目的是__．筛选含重组DNA的农杆菌，培养基中应添加__．

（5）生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是__．

Answer 1

【答案】 4 2 2 ABD 利用农杆菌Ti质粒的T﹣DNA，将Bt毒蛋白基因整合到植物细胞染色体DNA上 氨苄青霉素 降低害虫种群中抗Bt毒蛋白基因的基因频率的增长速率

【解析】

分析题图：图示表示转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程，其中①是含有目的基因的外源DNA分子，其中含有限制酶HindⅢ、BamHⅠ和BstⅠ的切割位点，且BamHⅠ和BstⅠ的识别序列相同；②表示基因表达载体的构建过程．③表示采用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞的过程；④表示目的基因的表达。

（1）由HindⅢ酶识别序列为切后，因此，得到DNA片段的末端是。

（2）图①中，从苏云金杆菌的DNA被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成3种DNA片段．而质粒被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成2种DNA片段，其中有1种与目的基因相同，所以反应管中有4种DNA片段。因HindⅢ、BamHⅠHind切割质粒可形成两种长度不同的片段，因此用DNA连接酶连接形成的重组质粒有2种；而BamHⅠ切割质粒只能形成一种长度的片段，但可能会出现正向和反向连接，所以用DNA连接酶能连接形成2种重组质粒。

（3）质粒要能进行复制才能得到更多的表达产物，所以构建基因表达载体后，不能影响质粒的复制、表达和抗性基因的表达，故选ABD。

（4）用农杆菌的Ti质粒作运载体，目的是利用农杆菌Ti质粒的T﹣DNA，将Bt毒蛋白基因整合到植物细胞染色体DNA上。筛选含重组DNA的农杆菌，培养基中应添加氨苄青霉素。

（5）生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中抗Bt毒蛋白基因的基因频率的增长速率。