题目内容
【题目】如图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答．
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤是：_____、_____、_____、 ____．
（2）过程②必需的酶是______酶，过程③必需的酶是______酶．
（3）与人体细胞中胰岛素基因相比，通过②过程获得的目的基因不含有非编码区和______．
（4）在利用AB获得C的过程中，必须用______切割A和B，使它们产生______，再加入______，才可形成C．
（5）为使过程⑧更易进行，可用______（药剂）处理D．一般将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是______．
【答案】获取目的基因 构建表达载体导入受体细胞目的基因检测与鉴定逆转录解旋内含子同种限制性内切酶相同的黏性末端DNA连接酶CaCl2农杆菌转化法
【解析】
根据题意和图示分析可知：图示是利用基因工程技术生产胰岛素的操作过程示意图。图中①表示从胰岛B细胞中获取胰岛素mRNA的过程；②为逆转录过程，A为胰岛素基因；③④⑤表示目的基因的扩增过程；⑥表示用限制酶切割运载体形成黏性末端的过程；⑦表示基因表达载体的构建过程；⑧表示将目的基因导入受体细胞的过程；⑨表示目的基因随着受体细胞的增殖和扩增；⑩是从培养液中获取胰岛素的过程。
（1）基因工程的操作步骤：目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和鉴定。
（2）②为逆转录过程，需要逆转录酶的参与；过程③是将DNA分子双链拆分成两条单链，所以必需的酶是解旋酶。
（3）与人体细胞中胰岛素基因相比，通过②过程获得的目的基因不含有非编码区和内含子。
（4）在利用AB获得C的过程中，必须用同种限制性内切酶切割A和B，使它们产生相同的黏性末端，再加入DNA连接酶，才可形成C。
（5）⑧是将目的基因导入受体细胞的过程，当受体细胞是微生物细胞时，常采用感受态细胞法，即用CaCl2处理微生物细胞使其成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞，从而将目的基因导入受体细胞．一般将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法。
