题目内容
【题目】为证明青霉素在某种细菌产生抗药性过程中所起的作用是选择而非诱变,有如下实验方案。其中,平板影印指用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上,然后不转动任何角度,“复印”至新的培养基上进行接种。请回答:
（1）图中扩大培养的过程中应选用__________培养基。利用__________分离法可获得
培养皿上菌落。
（2）图中②过程培养基的配方如下:
成分 | 无机盐 | 蔗糖 | 葡萄糖 | 尿素 | 牛肉膏 | 水 | 琼脂 | 酚红 |
培养基 | + | - | + | + | - | + | + | - |
结合图形分析__________(“能”或“不能”)得出结论:该细菌可利用尿素作为氮源。理由是:__________。
（3） B组培养基中还添加了适宜浓度的青霉素,结果如图所示。欲证明青霉素所起的作用是选择,则应选取__________(A. a1 B. a2 C. b1或b2或3 D.任意一个菌落)菌落继续培养在空白的A2培养皿中,待长出菌落后影印到含相同浓度青霉素的C培养皿中。
（4）预测上述A2和C培养皿中菌落的生长情况为__________(“相同”或“不同”),由此证明青霉素所起的作用是选择。
（5）下列关于微生物培养的叙述,正确的是（_____）
A.实验过程中所有器皿和培养基都必须用高压蒸汽灭菌法进行灭菌
B.实验操作过程中必须打开超净台上的紫外灯和过滤风
C.涂布分离法,单菌落更易分开,但操作更复杂
D.采用划线分离时,在每次划线前都需蘸取菌液一次
【答案】 液体 涂布 不能 该细菌可能利用氮气作为氮源或培养基中无酚红,无法证明该细菌分解了尿素 A 相同 C
【解析】本题考查微生物的培养和分离的知识点，意在强化学生的识记和理解能力。
(1)液体培养基具有进行通气培养、振荡培养的优点，在通气或在振荡的条件下，有利于营养物质的摄入以及增加供氧量，所以有利于细胞生长，提高生微生物数量。故图中扩大培养的过程中应选用液体培养基；菌种的分离常用涂布平板法。
（2）由表格内容可知，葡萄糖是碳源，尿素是氮源，但微生物也可能利用空气中的氮气作为氮源，故不能得出该细菌可利用尿素作为氮源的结论；并且培养基中未加入酚红指示剂，不能对菌种作进一步的鉴定；
（3）欲证明青霉素所起的作用是选择，菌种应在未添加青霉素的培养基中选择，即选择a1菌落继续培养在空白的A2培养皿中扩大培养，待长出菌落后影印到含相同浓度青霉素的C培养皿中。
（4）如果A2和C培养皿中菌落的生长情况相同，则证明变异是在接触青霉素之前就已经产生了，青霉素所起的作用是选择。
（5）培养基用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，接种环等用具可用灼烧灭菌，A项错误；紫外线对人有伤害，如果超净台的玻璃关死，也没必要开吹风，B项错误；常用接种方法中的稀释涂布平板法一般多用于筛选菌株，可以计数，可以观察菌落特征，但由于需要多次稀释，操作较复杂，C项正确；采用划线分离时，在每次划线前都要对接种环灼烧处理，目的是清除残留的菌种，如果再蘸取菌液，将达不到稀释的目的，D项错误；
[点睛]：微生物培养中的易混点：1.无菌技术中对相关的器皿、接种用具和培养基等用不同的灭菌方法；2. 常用接种方法：平板划线法一般多用于菌种的纯化，可以观察菌落特征；稀释涂布平板法一般多用于筛选菌株，可以计数，可以观察菌落特征；3.在以尿素为惟一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变红，这样就能初步鉴定该种细菌能够分解尿素。
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