题目内容
【题目】为增加油葵种子中的含油量,科学家尝试将花生中的酶A基因导入油葵细胞,获得转基因油葵新品种。
(1)为获取目的基因,可从花生细胞中提取______________,经逆转录形成____________。以此为模板通过_____________扩增目的基因。
(2)构建重组DNA分子需用载体,常见的载体有____________;构建好的载体一般都包括以下几个部分:启动子、目的基因和__________________
(3)剪取油葵的叶片放入浸染液中,一段时间后筛选获得转基因油菜细胞。最后经过___________培育成转基因油葵植株,此种技术的原理是___________________。
(4)研究发现,如果将该酶A的20位和24位氨基酸变为半胱氨酸其催化能力将提高2倍。通过蛋白质工程对酶A进行改造,所需步骤有:蛋白质的结构和功能分析→_______→________→将改造后的酶A基因导人受体细胞→获得所需的蛋白质。
(5)经过种植转基因油葵发现,虽然转基因油葵种子中含油量上升,但是抗灰霉菌的能力丢失,其原因是_______。
【答案】mRNA cDNA PCR技术 质粒、动植物病毒、λ噬菌体的衍生物等 终止子和标记基因 植物组织培养技术 植物细胞的全能性 蛋白质的结构设计 酶A基因的定向改造 抗灰霉菌基因没有表达(或丢失等)
【解析】
基因工程基本操作顺序:目的基因获取(从基因文库中获取、利用PCR技术扩增、人工合成),表达载体的构建(启动子+目的基因+标记基因+终止子),将目的基因导入受体细胞(植物细胞用农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法,动物细胞用显微注射法,微生物细胞用感受态细胞法),目的基因的检测与鉴定(导入检测用DNA分子杂交技术,转录检测用分子杂交技术,翻译检测用抗原——抗体杂交法)。蛋白质工程过程:预测蛋白质的功能→设计预期蛋白质的结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成DNA→表达出蛋白质。
(1)逆转录需要从花生细胞中提取mRNA为模板,以脱氧核苷酸为原料合成cDNA;通过PCR技术扩增目的基因。
(2)构建重组DNA分子需用载体,常见的载体有质粒、动植物病毒、λ噬菌体的衍生物等;构建好的载体一般都包括启动子、目的基因、标记基因和终止子。
(3)得到转基因油菜细胞后,要培育成转基因油葵植株,需要用植物组织培养技术才能实现,该技术的原理是植物细胞的全能性。
(4)通过蛋白质工程对酶A进行改造的步骤为:蛋白质的结构和功能分析→蛋白质的结构设计→酶A基因的定向改造→将改造后的酶A基因导人受体细胞→获得所需的蛋白质。
(5)抗灰霉菌的能力丢失的原因是抗灰霉菌基因没有表达(或丢失)。