题目内容
【题目】富集培养是从微生物混合群开始，对特定种的数量比例不断增高而引向纯培养的一种培养方法。从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。联苯降解菌内的联苯水解酶是催化多聚联苯（环境污染物）降解的关键酶，下图示意用富集方法从土壤中分离联苯降解菌的过程。请分析回答：
（1）①②③过程目的是___________________________。
（2）进行⑤过程的目的是_________________，可采用____________法将初筛菌液接种在固体培养基上。在⑤过程中，首先要对培养基和培养皿要进行高压蒸汽灭菌，目的是________________________________________。
（3）在⑥和⑦的实验检测过程中，作为对照组的是________________组，设置实验组的目是_________________________________________________________________ 。
（4）若用此方法从土壤中分离自生固氮菌，菌落在平板上培养时间不宜过长的原因是__________________________。配置的培养基中所需的营养物质有____________
A、碳源 B、氮源 C、生长因子 D、水分 E、无机盐
（5）某同学在做微生物实验时，不小心把自生固氮菌和酵母菌混在一起，请你写出分离得到纯度较高的自生固氮菌和酵母菌的实验原理__________________________。
【答案】通过富集培养，增大联苯降解菌（目的菌）的浓度（比例） 获得联苯降解菌的单个菌落（进一步分离纯化目的菌） 稀释涂布法 杀灭细菌和芽孢，防止杂菌干扰实验结果 ⑦ 说明获得的单菌落中没有其它杂菌 自生固氮菌会分泌含氮化合物，引起杂菌生长 A（C）DE 自生固氮菌能在无氮培养基上生长繁殖，而酵母菌则不能；青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖
【解析】
（1）微生物培养的程序：a．器具的灭菌、b．培养基的配制、c．培养基的灭菌、倒平板、d．微生物接种、e．恒温箱中培养、f．菌种的保存；在培养的过程中一定要注意无菌操作。
（2）选择培养基：选择培养基是根据不同微生物在代谢过程中所需要的营养物质和环境不同而配制的。不同微生物对某些化学药品的抵抗力不同，利用这些特点，我们便可配制出适于某些微生物生长而抑制其他微生物的选择培养基，例如从土壤中分离放线菌时，可在培养基中加入10%的酚数滴，抑制细菌和真菌的生长；根据对营养物质的特殊的需求，可以选择不同的微生物，比如尿素分解菌的氮源是尿素，纤维素分解菌的碳源是纤维素。
（1）①②③过程目的是通过富集培养，增大联苯降解菌（目的菌）的浓度（比例）。
（2）进行⑤过程的目的是获得联苯降解菌的单个菌落（进一步分离纯化目的菌），可采用稀释涂布法法将初筛菌液接种在固体培养基上；在⑤过程中，首先要对培养基和培养皿要进行高压蒸汽灭菌，目的是杀灭细菌和芽孢，防止杂菌干扰实验结果。
（3）在⑥和⑦的实验检测过程中，⑦作为实验的对照组，实验组⑥能够说明获得的单菌落中没有其它杂菌。
（4）由于自生固氮菌会分泌含氮化合物，引起杂菌生长，因此用此方法从土壤中分离自生固氮菌，菌落在平板上培养时间不宜过长．由于自身固氮菌能够固定空气的氮元素，因此在培养基中不加氮源可以起到选择作用，但是碳源、生长因子、水分和无机盐等仍然是必须的成分。
（5）自生固氮菌能在无氮培养基上生长繁殖，而酵母菌则不能，因此可以用无氮培养基筛选出自身固氮菌；而青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖，因此在含有青霉素的培养基中可以筛选出酵母菌。
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