Question

【题目】草甘膦是一种广谱除草剂，其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成，最终导致植物死亡。但是，它的使用有时也会影响到农作物的正常生长。目前，已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因，若将该基因转入农作物植物细胞内，从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦。

（1）下图A-F表示6株植物，其中，植物A和D对草甘膦敏感，B和E对草甘膦天然具有抗性，C和F则经过了转基因处理，但是否成功还未知。若ABC浇清水，DEF浇的水中含有草甘膦，上述DEF植物中，肯定能健康成长的是 。

（2）限制酶是基因工程必需的工具酶，其作用是。

（3）将图1①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有 种DNA片段。

（4）假设图1中质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ的碱基序列，现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，则该图1中①的DNA右侧还能选择BamHⅠ进行切割，并能获得所需重组质粒吗？ 请说明理由 。

（5）若上述假设成立，并成功形成重组质粒，则重组质粒（ ）

A．既能被BamHⅠ也能被HindⅢ切开

B．能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切开

C．既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切开

D．能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切开

（6）图2中不同组织细胞的相同DNA进行过程③时启用的起始点 （在“都相同”、“都不同”、“不完全相同”中选择），其原因是 。

（7）要想检测导入的EPSPS基因是否表达，在分子水平上可用 方法进行检测。

Answer 1

【答案】（1）E

（2）能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开

（3）4 （4）能 切割后露出的黏性末端相同

（5）D

（6）不完全相同 不同组织细胞中基因会进行选择性表达

（7）抗原-抗体杂交

【解析】

试题分析：（1）在DEF中因为E具有草甘膦抗性所以肯定能存活，而D敏感不能成活，F是否转入成功不知道，所以不一定能成活。

（2）限制酶的作用是能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。

（3）将图1①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，从苏云金杆菌的DNA被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成3种DNA片段．而质粒被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成2种DNA片段，其中有1种与目的基因相同，所以反应管中有4种DNA片段。

（4）由图可知限制酶BamHⅠ和BclⅠ切割后的黏性末端相同，所以当用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，则该图1中①的DNA右侧还能选择BamHⅠ进行切割，所以是能。

（5）因为重新形成的重组质粒中没有了BamHI识别的序列，所以不能被其切开，但HindIII没有改变，所以可以被其切割，故D正确。

（6）由图可知③是转录，所以在不同组织细胞的相同DNA进行过程③时启用的起始点不完全相同，因为不同组织细胞中基因会进行选择性表达。

（7）要想检测基因是否表达应采用抗原-抗体杂交技术。