题目内容
【题目】内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽,与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系。研究发现内皮素功能异常与内皮素主要受体ETA有关,科研人员通过构建表达载体,实现了ETA基因在细胞中高效表达。其过程如下(图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为CCC'GGG,限制酶XhoI的识别序列为C'TCGAG)。据图回答下列问题:
(1)图中ETA基因能够在大肠杆菌细胞内表达的原因是 。
(2)过程①中需要用 酶处理,过程③中,限制酶Xho I切割DNA形成的黏性末端是 。用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是 。
(3)图中的基因表达载体至少还缺少 ,鉴定ETA基因是否导入受体细胞需要用放射性同位素或荧光分子标记的 作探针。
(4)已知荧光显微镜可以通过检测荧光的强度来判断SNAP基因是否表达及表达量。因此,利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是 .
(5)人皮肤黑色素细胞上有内皮素的特异受体,内皮素与黑色素细胞膜上的受体结合后,会刺激黒色素细胞的增殖、分化并激活酪氨酸酶的活性,从而使黑色素增加。美容时可以利用注射ETA达到美白祛斑效果,原因是 ,从而抑制了黑色素细胞的增殖和黑色素的形成。
【答案】(1)所有生物共用一套遗传密码
(2)逆转录 —AGCT(或
使目的基因定向连接到载体上(避免目的基因及载体的任意连接)
(3)终止子 ETA基因
(4)检测ETA基因能否表达及表达量
(5)ETA能与内皮素结合(减少了内皮素与黑色素细胞膜上内皮素受体的结合)
【解析】
试题分析:(1)目的基因能够在受体细胞表达的原因是不同的生物共用一套遗传密码。
(2)据图分析,过程①是RNA形成DNA的逆转录过程,需要逆转录酶的催化。过程③中限制酶XhoI切割DNA形成的黏性末端是—AGCT。用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,可以避免目的基因及载体的任意连接,使目的基因定向连接到载体上。
(3)图中基因表达载体含有启动子、标记基因和目的基因,没有终止子。鉴定ETA基因是否导入受体细胞需要用放射性同位素或荧光分子标记的ETA基因作探针。
(4)检测SNAP基因是否表达及表达量时,利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因。
(5)ETA能与内皮素结合,减少了内皮素与黑色素细胞膜上内皮素受体的结合,可以抑制了黑色素细胞的增殖和黑色素的形成。