题目内容
【题目】Ⅰ.如图是以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程简图，分析并回答：
（1）过程甲中使用的微生物是__________。在鲜苹果汁装入发酵瓶时，要留有大约__________的空间。经过10～12天后，在酸性条件下用重铬酸钾检测样液，如果颜色变为__________色，说明产生了酒精。
（2）过程乙中使用的微生物是__________，可以从食醋中分离纯化获得，步骤如下：
第一步：配制固体培养基。
第二步：对培养基进行灭菌，其方法是______________________________。
第三步：接种。
第四步：培养。温度控制在__________℃范围内。
第五步：挑选符合要求的菌落。
（3）在__________________的条件下，如果缺少糖源，乙中的微生物将甲过程的产物变为__________，再将其变为__________。
Ⅱ.下表是某同学列出的分离土壤中微生物培养毡的配方，据此回答下列问题：
培养基配方 | |
KH2PO4 | 1.4g |
Na2HPO4 | 2.1g |
MgS04·7H20 | 0.2g |
葡萄糖 | 10.0g |
尿素 | 1.0g |
琼脂 | 15.0g |
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL | |
（1）该培养基中提供氮源的物质是___________，细菌能利用该氮源是由于体内能合成___________酶，将尿素分解成___________，使培养基的pH值___________（升高/降低）
（2）在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时，还需在培养基中加入________________指示剂，若指示剂变___________，说明有目的菌株存在。
（3）为了测定微生物的数量，接种时应采用法，某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液O.lmL，培养后菌落数分別为180、155、176、129个，则每毫升原土壤液中上述微生物的数量为___________，统计菌落数往往比实际活菌数___________（填“低”“高”“基本一致”），原因是___________。
【答案】 酵母菌 1/3 灰绿 醋酸(杆)菌 高压蒸汽灭菌 30～35 氧气充足（有氧） 乙醛 醋酸 【答题空10】尿素 脲(催化尿素分解的) 氨 升高 酚红 红 1.6×109 低 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
【解析】试题分析：据图分析，甲表示果酒发酵，参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型；乙表示果醋发酵，参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。根据表格分析，该培养基含有琼脂，为固体培养基，含有的唯一氮源是尿素。能够分解利用尿素的细菌，其细胞内含有脲酶，可以把尿素分解成氨，提供N源，进一步利用，只含有尿素作为N源的培养基对微生物具有选择作用。
（1）根据以上分析已知，参与过程甲的微生物是酵母菌。在鲜苹果汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，以防止发酵液溢出。经过10～12天后，在酸性条件下用重铬酸钾检测样液，如果颜色由橙色变为灰绿色，说明产生了酒精。
（2）乙是果醋发酵过程，参与果醋制作的微生物是醋酸（杆）菌。固体培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌；醋酸菌生存的适宜温度是30-35℃，因此培养时要将温度控制在30-35℃范围内。
（3）在氧气充足（有氧）的条件下，如果缺少糖源，醋酸菌可将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
Ⅱ.（1）根据以上分析已知，该培养基以尿素为唯一氮源；细菌能利用该氮源是由于体内能合成脲酶，将尿素分解成氨，从而使培养基的pH值升高。
（2）在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时，还需在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，说明有目的菌株存在。
（3）纯化微生物可以用稀释涂布法和平板划线法，其中稀释涂布法能用于微生物的计数．1毫升原土壤样液中上述微生物数量=（180+155+176+129）÷4×106×10=1.6×109个；用稀释涂布平板法进行微生物的计数，但统计的数量比实际数量会偏少，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
