Question

【题目】图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点，ampr表示氨苄青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性基因．下列叙述正确的是

A. 图甲中的质粒用BamHⅠ切割后，含有4个游离的磷酸基团

B. 在构建重组质粒时，可用PstⅠ和BamHⅠ切割质粒和外源DNA

C. 用PstⅠ和HindⅢ酶切，可以保证重组DNA序列的唯一性

D. 导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长

Answer 1

【答案】C

【解析】

据图分析，BamHⅠ切割位点在目的基因上，不能用该酶切割外源DNA；该外源DNA右侧只有PstⅠ一种限制酶，而该酶会破坏甲图质粒上的标记基因ampr；该外源DNA左侧有两个限制酶切割位点，其中PstⅠ切割会导致目的基因的自身连接以及与质粒的任意连接，因此左侧应该用HindⅢ进行切割。

图甲中的质粒用BamHⅠ切割后，相当于一个直链DNA，含2个游离的磷酸基团，A错误；根据以上分析已知，BamHⅠ会破坏目的基因，不能用于外源DNA的切割，B错误；用PstⅠ和HindⅢ酶切质粒和目的基因，使得目的基因和质粒的两端分别形成两种粘性末端，可以保证重组DNA序列的唯一性，C正确；根据以上分析已知，该过程中使用的PstⅠ已经破坏了Ampr（氨苄青霉素抗性基因），因此导入目的基因的大肠杆菌不能在含氨苄青霉素的培养基中生长，应该在含新霉素的培养基中生长，D错误。