题目内容
【题目】在生产研究上，常常需要进行微生物的培养和计数。回答下列与微生物的培养与利用有关的问题：
（1）下图是利用______________法将微生物接种到固体培养基上，把混合的菌种逐步稀释分散获得______________菌落。接种后培养基应______________放在37 ℃恒温培养箱中进行培养。
（2）分析下面培养基的配方：NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO47H2O、KCl、H2O。若此培养基用于筛选尿素分解菌，则应除去上述培养基成分中的________，并加入______________和________，以补充其生活所需的______________和________。培养基中加入酚红作指示剂的原因是尿素分解菌能合成________将尿素分解为氨，使培养基pH发生改变，酚红由黄变红，使菌落周围呈现红色。
（3）三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中，取0.2 mL稀释液涂布，得到以下统计结果：
甲同学涂布了1个平板，统计的菌落数是260；
乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240和246，取平均值232；
丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163；
在三位同学的统计中，____________同学的统计结果是相对准确可信的。按照该同学的结果，每毫升原液中的菌体数是______________。
（4）实验结束后，使用过的培养基应该进行_____________处理后，才能倒掉。
【答案】 平板划线 单个 倒置 NaNO3 尿素 葡萄糖 氮源 碳源（要求：前后对应） 脲酶 乙 1.16×109 灭菌
【解析】（1）由图可知，其采取的是平板划线法，该方法能把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。接种后培养基应倒置放在37 ℃恒温培养箱中进行培养。
（2）培养分解尿素的细菌，其氮源是尿素，所以培养基中要除去含氮物质，即去除NaNO3，并加入尿素和葡萄糖，以提供氮源和碳源。尿素分解菌能合成脲酶将尿素分解为氨，使培养基pH发生改变，酚红由黄变红，使菌落周围呈现红色，所以培养基中要加入酚红作指示剂。
（3）甲同学只涂布了1个平板，实验数据说服力不够；丙同学其中一个平板的计数结果与另两个相差太远，且少于30个菌落，数据缺乏正确性；乙同学的统计结果是相对准确可信的。乙同学测得平板上菌落数的平均值为232，那么每毫升样品（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2 mL） 中的菌落数是=232×1/0.2×106=1.16×109（个）。
（4）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后，才能倒掉。
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【题目】小球藻是一种单细胞真核藻类，直径38微米。某生物兴趣小组开展了“探究小球藻种群增长的最适pH”的实验，结果见下表（密度单位：×106个/mL）。回答下列问题：
pH=6 | 1.0 | 3.0 | 3.8 | 4.6 | 3.0 | 2.2 | 1.8 | 1.5 |
pH=7 | 1.0 | 4.6 | 5.3 | 4.2 | 2.1 | 1.2 | 0.8 | 0.6 |
pH=8 | 1.0 | 5.2 | 5.6 | ? | 2.9 | 1.0 | 0.6 | 0.2 |
pH=9 | 1.O | 3.7 | 5.1 | 3.8 | 2.2 | 1.3 | 0.7 | 0.5 |
pH=10 | 1.O | 1.5 | 1.8 | 2.0 | 2.3 | 1,3 | 0.8 | 0.1 |
（1）实验过程中需要控制的无关变量有___________（至少写两项）。
（2）本实验未设置空白对照，原因是______________________。
（3）据上表分析，小球藻种群数量增长的最适pH约是___________。
（4）该实验中需每天定时对小球藻进行取样计数。
①取出的样液需立即加入固定液，其目的是______________________。
②在计数前通常需要将样液稀释，这是因为______________________。
③采用血球计数板（规格为1mm×1mm×O.lmm）计数。pH为8的实验组，第3天取样观察到的计数室中某中方格小球藻分布如下图所示，据此推算培养液中小球藻的密度是___________。
