题目内容
【题目】根据基因工程的有关知识。回答下列问题。
(1)大肠杆菌质粒常作为基因工程目的基因的载体,另外,__________和动植物病毒也可作为载体,若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,而常用Ca2+处理大肠杆菌,其目的是___________________。
(2)利用转基因技术实现胰岛素的批量生产是目前治疗糖尿病的新思路,该过程中的关键操作环节是____________________________。
(3)对于胰岛素基因的获取,途径之一是通过提取_____________细胞中的胰岛素mRNA,经过反转录过程合成目的基因,之后通过_____________技术大量扩增。
【答案】λ噬菌体的衍生物 提高受体细胞的转化率(或使之成为感受态细胞,有利于其吸收重组DNA分子) 基因表达载体的构建 胰岛B PCR
【解析】
基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成;(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等;(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样,将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法;(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测是否插入目的基因可用DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA可用分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质可用抗原-抗体杂交技术;个体水平上的鉴定有:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等;据此分析。
(1)基因工程常用的运载体除了大肠杆菌质粒、动植物病毒外,还有λ噬菌体的衍生物等;未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱,因此常用Ca2+处理大肠杆菌,使之成为感受态细胞,有利于其吸收重组DNA分子。
(2)基因工程的核心步骤是构建基因表达载体。
(3) 胰岛素基因只能在胰岛B细胞中选择性表达,因此应该从胰岛B细胞提取胰岛素mRNA,经过逆转录形成胰岛素基因,再通过PCR技术大量扩增目的基因。
【题目】日常生活中,黄曲霉素和苯是两种常见的有害物质。为了探究黄曲霉素、苯对细胞癌变的影响,某生物实验小组以小鼠作为实验对象设计并实施了如下实验:
(1)材料:取____的小鼠若干,均分为A、B、C、D四组,生理盐水配制的0.0lmol/L黄曲霉素溶液,生理盐水配制的0.0lmol/L苯溶液,生理盐水,注射器等。
实验过程:
组别 | 注射物 | 癌变率 |
A | 黄曲霉素溶液lml | ++ |
B | 苯溶液1ml | ++ |
C | 黄曲霉素溶液0.5ml+苯溶液0.5ml | +++++++ |
D | 0 |
(说明:癌变率=癌变小鼠数/每组小鼠总数×l00%,“十”的数量表示癌变率的高低)
(2)上表中D组小鼠的注射物是____,黄曲霉素和苯属于____致癌因子,在这些致癌因子的作用下,细胞中____基因发生突变从而导致细胞癌变。
(3)上述实验结果可以得出的结论是____。
(4)为探究紫杉醇是否有治疗癌症的作用,请用上述A组实验结果中已经发生癌变且癌变程度相同的小鼠为材料,以肿瘤体积的改变量为检测指标,写出实验思路:____________________________________