题目内容
【题目】如图表示ATP的合成与分解过程。有关的叙述，不正确的是（ ）
A.细胞内的放能反应一般与ATP的合成相联系
B.甲过程中释放的能量可以用于细胞的主动运输
C.乙过程中产生的AMP是构成DNA的原料之一
D.催化甲和丁过程的酶不是同一种酶
【答案】C
【解析】
ATP分子的中文名称叫三磷酸腺苷，其结构简式为A-P～P～P，其中A代表腺苷，P代表磷酸基团，～代表高能磷酸键．ATP分子不稳定，水解时远离A的磷酸键容易断裂，并释放大量的能量，供给各项生命活动。ATP与ADP相互转化的反应式：ATPADP+Pi+能量（1molATP水解释放30.54KJ能量）。方程从左到右时能量代表释放的能量，用于各项生命活动。方程从右到左时能量代表转移的能量，动物中为呼吸作用转移的能量，植物中来自光合作用和呼吸作用。
A、细胞内的放能反应一般与ATP的合成相联系，细胞内的吸能反应一般与ATP的水解相联系，A正确；
B、ATP是直接能量来源，可为物质跨膜运输提供能量，B正确；
C、乙过程中产生的AMP是构成RNA的原料之一，C错误；
D、催化甲过程的酶是ATP水解酶，催化丁过程的酶是ATP合成酶，不是同一种酶，D正确。
故选C。
【题目】癌细胞表面蛋白“PDL-1”与T细胞表面蛋白“PD-1”特异性结合后，可抑制T细胞活性并启动其凋亡，导致肿瘤细胞发生免疫“逃逸”。研究者对“PD-1”基因进行克隆、表达及生物学活性鉴定，为制备抗体打基础。研究中所用引物α和β碱基序列见图1、几种常用限制酶名称及识别序列与酶切位点见图2：
α链：5'-T C A C T C G A G A C C A T G C A G A T C C C A C A G G C G C C C-3' β链：5'-C T C G A A T T C T C A G A G G G G C C A A G A G C A G T G-3' 图1 |
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（1）首先提取细胞中的mRNA反转录生成____________________作为模板；设计含有不同的限制酶切点的α和β序列为引物，通过____________________技术扩增目的基因。
（2）选用图1中的两种名称分别为____________________的限制酶将“pIRES2-EGFP质粒”载体进行双切，再用DNA连接酶将其与目的基因拼接，构建表达载体。该表达载体的组成，除了目的基因、标记基因抗卡那霉素基因外，还必须具有____________________等。
（3）而后一定温度下，与经过
处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有_____________培养基中，可筛选出已经完成转化的大肠杆菌，继续培养该种大肠杆菌以扩增重组DNA。
（4）将扩增后的“pIRES2-EGFP载体/PD-1重组DNA”转入可高度表达外源基因的原代293T细胞。一段时间后，为确定PD-1基因是否表达，检测细胞膜表面是否具有____________________。为判断其是否具有生物学活性和功能，则可裂解293T细胞，提取该物质看能否与____________________发生结合，从而阻断“PD-1与PDL-1信号通路”。研究中还会有一步骤，只将“pIRES2-EGFP载体”转入293T细胞，其目的是_________________________。
