题目内容
【题目】筛选大肠杆菌抗链霉素突变株的实验过程如下：
①取一个已经灭菌的空培养皿，斜放（一边垫起）放置，在无菌条件下倒入10mL不含药物的底层培养基（如图甲所示）；
②待培养基凝固后将培养皿放平，再倒入10mL含有链霉素的上层培养基，这样便得到链霉素浓度从一边到另一边逐渐升高的梯度平板（如图乙所示）；
③用移液管移取经诱变处理后的大肠杆菌细胞悬液0.1mL到梯度平板上，进行涂布；
④将平板倒置于恒温培养箱中培养2天，观察经一次培养的梯度平板上大肠杆菌的生长情况；
⑤选择如图丙所示平板上12个生长在梯度平板中部的单个齒落，用无菌接种环接触单个菌落朝高药物浓度的方向划线；
⑥将平板倒置于恒温培养箱中培养2天，经二次（或多次）培养后，在链霉素浓度比较高的部位长出的菌落即为抗链霉素突变株
据此请回答以下问题:
（1）该实验所用的培养基从用途上看是________培养基，为了使培养基能够凝固，通常需要在培养基中加入________________。
（2）涂布操作时，涂布器可沾取少量__________在火焰上引燃，进行灼烧灭菌。在固体培养基上接种后将平板进行_____________培养。
（3）若在培养基中加入伊红美蓝，则图丙培养皿中长出的菌落颜色为________。用无菌接种环接触单个菌落朝高药物浓度方向划线，其目的是______________。
（4）大肠杆菌的抗链霉素突变是培养基中的链霉素引起的吗？_______(填“是”“不是”），理由是_____。
【答案】选择琼脂酒精倒置黑色测试这些菌株的抗性水平不是大肠杆菌的抗链霉素突变发生于该菌接触链霉素之前，培养基中的链霉素只起到选择作用
【解析】
培养基从用途上分为鉴别培养基和选择培养基，这两种用途的培养基通常都是固体培养基，需要在培养基中加入起凝固作用的琼脂。鉴别培养基是用于鉴定特定菌种是否存在的培养基，如鉴别大肠杆菌需要在培养基中加入伊红美蓝，如果出现黑色菌落，则说明存在大肠杆菌菌落；选择培养基是用于筛选所需类型的培养基，如为了筛选到抗链霉素的大肠杆菌突变株，需要在培养基中加入起选择作用链霉素，根据题干中操作方法，如果能在较高浓度链霉素的培养基中形成菌落则为抗链霉素的菌株。
（1）题中实验目的是为了筛选大肠杆菌抗链霉素突变株，所以所用的培养基从用途上分，属于选择培养基，为了使培养基能够凝固，通常需要在培养基中加入凝固剂——琼脂。
（2）涂布操作时，涂布器可沾取少量酒精在火焰上引燃，进行灼烧灭菌。在固体培养基上接种后将平板进行倒置培养，以防止培养皿盖上的水珠落入培养基感染杂菌。
（3）由于大肠杆菌在加入伊红美蓝的培养基会形成黑色的菌落，所以图丙培养皿中长出的菌落颜色为黑色。用无菌接种环接触单个菌落朝高药物浓度方向划线，其目的是让接种环携带大肠杆菌到高药物浓度处，若能正常生长，说明该大肠杆菌抗链霉素的能力强，即测试这些菌株的抗性水平。
（4）培养基中的链霉素不是诱发大肠杆菌突变的因素，只是对大肠杆菌是否具有抗性进行选择而已，所以大肠杆菌抗链霉素突变不是由链霉素引起。
