Question

【题目】回答下列关于基因工程的相关问题：

（1）获取目的基因及目的基因和运载体结合的过程需要用到的工具酶有________________。质粒DNA分子上有特殊的___________，供重组DNA的鉴定和选择。

（2）获得目的基因后，利用PCR技术将该基因扩增时，需要添加的有机物质除了模板、原料外，还应加入___________。将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是________________。

（3）基因工程技术中，科学家可以从基因文库中获取目的基因，基因文库包括基因组文库和cDNA文库，后者比较小，原因是_________________________________________。

（4）若要检测目的基因是否转录和翻译，采用的检测方法分别是________________。

（5）基因治疗是指把_______导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，这是治疗遗传病的最有效的手段。

Answer 1

【答案】限制酶、DNA连接酶 标记基因 引物、Taq酶（或耐高温的DNA聚合酶） 农杆菌转化法 cDNA文库是通过某种生物发育的某个时期mRNA反转录产生的多种互补DNA片段，在这个时期并不是所有的基因都进行转录 分子杂交和抗原-抗体杂交技术 正常基因

【解析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）获取目的基因及目的基因和运载体结合的过程需要用到的工具酶有限制酶、DNA连接酶。质粒DNA分子上有特殊的标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。

（2）PCR技术扩增目的基因时，需要添加的有机物质除了模板、原料外，还应加入引物、Taq酶（或耐高温的DNA聚合酶）。将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法。

（3）cDNA文库是通过某种生物发育的某个时期mRNA反转录产生的多种互补DNA片段，在这个时期并不是所有的基因都进行转录，故cDNA文库比基因组文库小。

（4）若要检测目的基因是否转录和翻译，采用的检测方法分别是分子杂交和抗原-抗体杂交技术。

（5）基因治疗是指把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。