题目内容
【题目】图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点,amp表示氨苄青霉素抗性原因,neo表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是( )
A. 图甲中的质粒用BamHⅠ切割后,含有4个游离的磷酸基团
B. 用PstⅠ和HindⅢ酶切,可以保证重组DNA序列的唯一性
C. 在构建重组质粒时,可用PstⅠ和BamHⅠ切割质粒和外源DNA
D. 导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长
【答案】B
【解析】图甲中的质粒只有一个BamHⅠ切割位点,切割后形成一个直链DNA,含2个游离的磷酸基团,A错误;用PstⅠ和HindⅢ酶切质粒切成两个片段,用PstⅠ和HindⅢ酶能将外源DNA切成三段,只有含目的基因的片段通过DNA连接酶与质粒连接形成的重组质粒符合要求,而另一个重组质粒无目的基因,不符合要求,从而保证重组DNA序列的唯一性,B正确;BamHⅠ切割位点在目的基因上,不能用该酶切割外源DNA,C错误;导入目的基因的大肠杆菌,其重组质粒是用PstⅠ和HindⅢ酶切割的,其中的Ampr(氨苄青霉素抗性基因)已被破坏,D错误。
【题目】进入冬季,部分城市出现严重雾霾,与秸秆野外焚烧有一定关系。为破解秸秆处理瓶颈,微生物专家力图通过微生物降解技术使秸秆能尽快腐烂掉,增加土壤肥力。缓解环境污染。试回答:
(1)专家研制的降解秸秆的催腐剂是十余种能分解纤维素的霉菌、细菌和酵母菌的组合。其中____在细胞结构上与其他两者不同。
(2)纤维素酶是一种复合酶,其中的葡萄糖苷酶可以将纤维二糖分解为____。
(3)微生物专家为从发黑的树干上分离出有分解纤维素能力的高产菌株,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):
酵母膏 | 无机盐 | 淀粉 | 纤维素粉 | 琼脂 | CR溶液 | 水 | |
培养基甲 | + | + | + | + | - | + | + |
培养基乙 | + | + | + | - | + | + | + |
注:“+”表示有,“-”表示无。CR(刚果红)能与培养基中纤维素形成红色复合物
据表判断,培养基甲____(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是____;培养基乙____(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是____。
(4)图中降解纤维素能力最强的菌株是①,筛选时应选择D/d较大的菌株(降解圈直径D、菌落直径d),因为这一指标越大说明____。
(5)在分离高产纤维素酶菌种的实验操作中,对获得纯化的纤维素酶高产菌单菌落影响最大的是(______)
A.实验所用的孢子来源于多个菌株
B.涂布前涂布器未在酒精灯火焰上灼烧灭菌
C.用已添加纤维素的蔗糖豆芽汁培养基作为选择培养基
D.实验操作过程中未打开超净台的过滤风