题目内容
【题目】如图是“DNA的粗提取和鉴定”实验中几个重要操作示意图,下列叙述正确的是( )
A.图①为提取鸡细胞核内的DNA,玻璃棒应按逆时针方向搅拌10 min
B.图②对图①的溶液进行过滤,纱布上是一些固体杂质,DNA在滤液中
C.图③加入蒸馏水将浓NaCl2稀释至0.14 mol·L-1,以析出溶液中的DNA
D.图④加入冷却的体积分数为95%的酒精更有利于提高DNA的溶解度
【答案】BC
【解析】
1、DNA粗提取和鉴定的原理:
(1)DNA的溶解性:DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质溶于酒精;DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。
(2)DNA的鉴定:在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
2、DNA粗提取和鉴定的过程:
(1)实验材料的选取:凡是含有DNA的生物材料都可以考虑,但是使用DNA含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大。
(2)破碎细胞,获取含DNA的滤液:
动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞,需要先用洗涤剂溶解细胞膜。例如,提取洋葱的DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。
(3)去除滤液中的杂质:
方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质,不分解DNA;方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同。
方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的DNA与蛋白质分开;方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白质变性,与DNA分离。
(4)DNA的析出与鉴定:
①将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液,静置2~3min,溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水分。
②取两支20mL的试管,各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5mL,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色的变化,看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。
A、图①为提取鸡细胞核内的DNA,玻璃棒应按顺时针方向搅拌5 min,A错误;
B、图②是对图①的溶液进行过滤,纱布上是一些不溶的固体杂质,DNA在滤液中,B正确;
C、DNA在0.14 mol·L-1的NaCl溶液中溶解度最低,因此能析出,C正确;
D、某些蛋白质能溶解于酒精中,而DNA不溶于酒精中,用冷却的95%酒精对DNA的凝集效果更佳,D错误。
故选BC。