Question

【题目】目的基因的分离、克隆以及目的基因的结构与功能研究，一般位于整个基因工程的上游。将含有某种生物不同基因的许多DNA片段导入受体菌的群体中储存，可获得该种生物的基因文库。请回答下列问题：

（1）目的基因可以在构成基因文库的受体菌中____________________。从基因多少的角度分析，cDNA文库含有某种生物的__________。

（2）区别于基因组文库，在构建cDNA文库时需要用到__________酶，从cDNA文库中获得的目的基因__________（填“不含有”或“含有”）启动子。

（3）从基因文库中提取目的基因比较复杂，下图为一种思路：

该过程中需将纤维素膜上的细菌裂解，其目的是____________，再用32P标记的____________作为探针进行杂交。依据杂交结果，进一步操作为__________________________，才能获得含有目的基因的受体菌。

Answer 1

【答案】稳定存在并遗传 部分基因 逆转录 不含有 释放出DNA 目的基因 选取培养基上的a菌落继续培养

【解析】

1、基因文库包括基因组文库和部分基因文库。其中基因组文库包含某种生物所有的基因，而部分基因文库只包含某种生物的部分基因，如：cDNA文库。

2、以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。

3、基因组文库与cDNA文库比较：

文库类型	cDNA	基因组文库
文库大小	小	大
基因中启动子	无	有
基因中内含子	无	有
基因多少	某种生物的部分基因	某种生物的全部基因
物种间的基因交流	可以	部分基因可以

（1）目的基因可以在构成基因文库的受体菌中稳定存在并遗传。基因组文库包含某种生物所有的基因，而部分基因文库只包含某种生物的部分基因，如cDNA文库。

（2）区别于基因组文库，在构建cDNA文库时需要用到逆转录酶，由于cDNA文库中的目的基因是mRNA逆转录形成的，故不含有启动子。

（3）由于目的基因存在于菌体中，所以上述过程需将纤维素膜上的细菌裂解，其目的是释放出DNA，再用32P标记的目的基因作为探针进行杂交。依据杂交结果，a菌落的细菌DNA中出现了杂交带，说明a菌体中含有目的基因，可选取培养基上的a菌落继续培养，才能获得含有目的基因的受体菌。