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【题目】依据复制与宿主菌相关程度不同,细菌中的质粒分松散型质粒和严谨型质粒。当宿主菌蛋白质合成停止时, 严谨型质粒 DNA 复制随之停止,松散型质粒 DNA 复制仍可进行。

1)通常选用松散型质粒作为基因工程载体,原因是_____

2)细菌体内限制酶不剪切该细菌本身的 DNA,这是在长期的进化中形成了一套完善的_____,但能 对外源 DNA 进行降解,有利于_____。事实上,上述细菌仍允许部分异源 DNA 进入体内,其意义是_____

3)转化是指_____。在培育转基因荧光海马时发现转化不成功,原因可能是_____

4)人们已经认识到,从微生物到人类都共用一套遗传密码,这一事实为研究基因工程提供了什么启示:_____

【答案】目的基因容易复制。 防御机制 防止外源DNA(遗传物质)的入侵 有利于生物变异和进化 目的基因进入受体细胞并维持稳定核表达的过程 目的基因未导入受体细胞;目的基因未转录;目的基因未翻译(或未表达) 从蛋白质的氨基酸组成,推测和合成目的基因;某生物的基因可以转移到其他生物并表达出相同的蛋白质

【解析】

基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

1)当宿主菌蛋白质合成停止时,严谨型质粒 DNA 复制随之停止,松散型质粒 DNA 复制仍可进行,通常选用松散型质粒作为基因工程载体,原因是目的基因容易复制。

2)细菌体内限制酶不剪切该细菌本身的 DNA,这是在长期的进化中形成了一套完善的防御机制,保护自身DNA不被破坏,能对外源DNA进行降解,有利于防止外源DNA(遗传物质)的入侵。事实上,上述细菌仍允许部分异源 DNA 进入体内,其意义是有利于生物变异和进化。

3)转化是指目的基因进入受体细胞并维持稳定核表达的过程。在培育转基因荧光海马时发现“转化”不成功,原因可能是目的基因未导入受体细胞;目的基因未转录;目的基因未翻译(或未表达)。

4)从微生物到人类都共用一套遗传密码,这一事实为研究基因工程提供的启示:可以从蛋白质的氨基酸组成,推测和合成目的基因;某生物的基因可以转移到其他生物并表达出相同的蛋白质。

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