题目内容
【题目】科学家利用转基因技术培育了OsPHDI（水稻内原本也存在该基因>过量表达的水稻植株，以提高水稻的抗逆性（如抗干旱、抗高盐）。回答下列问题：
（l）为了验证OsPHDI基因的表达是否受逆境诱导，实验组需要给两叶期水稻设置_______条件，实验结果显示_______，说明OsPHDI基因的表达受逆境诱导。
（2）为了培育OsPHDI基因过量表达植株进行如下操作：
①利用PCR技术扩增获得大量OsPHDI基因，该操作的前提是_______。
②将OsPHDI基因与含有GFP（绿色荧光蛋白基因）的载体结合，此处GFP的作用是_______。
③常用_______法将表达载体导入水稻细胞；若受体细胞中出现绿色荧光，能否说明OsPHDI基因已成功导入受体细胞，并说出理由______________。
④最后利用_______技术培育出完整的抗逆性植株，该技术利用的生物学原理是______________
【答案】干旱，高盐（逆境） 实验组（逆境）植株OsPHDl基因的表达量高于对照（适宜条件）组 （需要一段已知OsPHDl基因的核苷酸序列以便）合成引物 作为标记基因（检测目的基因是否导人受体细胞） 农杆菌转化 不能，有可能导入了不含OsPHDl基因的GFP载体 植物组织培养 植物体细胞具有全能性
【解析】
1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
2、利用PCR技术扩增目的基因（适用于目的基因的核苷酸序列已知的情况）
①概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。
②原理：DNA复制
③条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。
（l）通过个体水平上验证OsPHDI基因的表达是否受逆境诱导，实验组需要给两叶期水稻设置干旱，高盐（逆境）条件，如果实验组（逆境）植株OsPHDl基因的表达量高于对照（适宜条件）组，说明OsPHDI基因的表达受逆境诱导。
（2）①利用PCR技术扩增获得大量目的基因，需要加入相应的引物，故利用PCR技术扩增获得大量OsPHDI基因，该操作的前提是合成引物。
②GFP（绿色荧光蛋白基因）的作用是作为标记基因，便于后期的筛选。
③表达载体导入植物细胞，常用农杆菌转化法；若受体细胞中出现绿色荧光，不能说明OsPHDI基因已成功导入受体细胞，因为有可能导入了不含OsPHDl基因的GFP载体。
④植物组织培养的生物学原理是植物体细胞具有全能性。故可通过植物组织培养技术培育出完整的抗逆性植株。
挑战100单元检测试卷系列答案【题目】从香辛料中提取有效成分作为食品的天然防腐剂具有广阔的前景。某实验小组分别从五种香辛料中提取精油(编号为 A、 B、 C、 D、 E)，并用这些精油对四种微生物进行了抑菌能力的实验研究，所得数据如下表所示。请回答
精油种类 抑菌圈直径（mm）菌种 | A | B | C | D | E |
大肠杆菌 | 21.1 | 26.0 | 15.1 | 24.0 | 23.2 |
白葡萄球菌 | 14.7 | 22.0 | 19.1 | 12.0 | 29.1 |
黑曲霉 | 24.6 | 33.0 | 26.0 | 24.5 | 49.6 |
青霉 | 25.3 | 38.2 | 24.3 | 25.1 | 42.8 |
（1）上表中，与制作泡菜的主要微生物结构相似的微生物是_____。
（2）在探究精油对微生物的抑菌能力时， 实验用的培养基中_____（填需要或不需要） 加入琼脂， 应采用____法进行接种， 判断精油的抑菌能力大小的指标是_____。
（3）实验结果表明，精油 E对细菌的杀伤作用_____（填“大于” 或 “小于）” 对真菌的杀伤作用。
（4）香辛料中提取精油常用萃取法， 萃取的效率主要取决于萃取剂的_____， 同时还受温度和时间长短等条件的影响。若要探究精油含量最高时的最佳萃取时间，请写出简要思路：_________________________。
【题目】科研人员测定小麦一昼夜净光合速率（Pn）的变化，发现小麦与其他植物一样出现了“午睡”现象。回答下列问题：
（1）一般认为，午后温度较高，植物通过蒸腾作用使叶片降温，同时，植物体也会通过叶片气孔开度__________来避免过度失水对细胞造成的损伤。
（2）科研人员测定了同一株小麦两种不同向光角度的叶片（接收直射光照面积不同）午后部分指标，结果如表：
净光合速率（Pn） | 叶片温度（TL） | 胞间CO2浓度（Ci） | |
直立叶 | 12.9 | 37.5 | 250 |
平展叶 | 8.8 | 37.7 | 264 |
对相关数据进行直立叶和平展叶叶片温度无明显差异，说明二者的气孔开度__________，而平展叶的净光合速率较低，胞间CO2浓度__________。可见气孔闭合引起的胞间CO2浓度不足不是造成“午睡”现象的唯一因素。
（3）小麦“午睡”现象还与叶片中的D1蛋白含量密切相关。现有研究表明：“强光照会导致D1蛋白含量下降，而植物激素水杨酸（SA）能减小D1蛋白含量下降的幅度”。请以小麦为实验材料，设计实验来验证这一结论。要求简要写出实验思路。________________________。