Question

【题目】受损伤的马铃薯细胞内酚氧化酶（PPO）和底物（酚类物质）直接接触，引起马铃薯的褐变，为探究温度对PPO活性的影响，实验小组进行如下实验：

（1）PPO粗提液的提取在________（填“低温”或“高温”）条件下将新鲜马铃薯用蒸馏水洗净、去皮，取20g样品放入含50mL磷酸缓冲液（pH值为5.5）的研钵中，同时加入少量石英砂，研磨、离心、上清液即为PPO的粗提液，加缓冲液研磨的目的是________

（2）不同温度下PPO活性的测定

步骤顺序	试管1	试管2	试管3	试管4	试管5	试管6	试管7	试管8
PPO粗提液	2mL		2mL		2mL		2mL
酚类底物		2mL		2mL		2mL		2mL
反应	混合振荡		混合振荡		混合振荡		混合振荡
温度预处理	（5min）0℃		15℃		30℃		45℃
保温时间	5min		5min		5min		5min
记录结果	+		++++		++++		++

（注：反应底物充足；实验结果中“+”越多褐色越深）

①实验步骤顺序有不妥之处，请改正________。

②实验结果表明：15℃和30℃温度条件，PPO具有相同的活性，从酶的特性分析其原因是________。

③为进一步探究PPO最适温度，应在________范围内设置温度梯度。

（3）I．在温度30℃的条件下，取等量提取液分别加到四支盛有等量过氧化氢溶液、pH分别为3、5、7、9的试管中，结果发现每一支试管都产生气体。请回答：

①该实验的课题是：________。

②各实验组均在30℃下进行的原因是：a________；b_______。

Ⅱ．将加入4支试管中的马铃薯提取液的量减半，重复实验I．分别测定实验I、Ⅱ中过氧化氢在相同时间内的含量变化，绘制成如图所示曲线，请回答：曲线A是实验________（选填I或Ⅱ）的结果。据图能否说明实验I、Ⅱ中酶活性不同？_______。

Answer 1

【答案】低温 保持PPO的活性（防止PPO失活） “反应”步骤改在“温度预处理”之后 在酶的最适温度前后，可以有相同的催化效率 15℃30℃ 探究不同pH对过氧化氢酶活性的影响 30℃是过氧化氢酶作用的适宜温度 排除温度变化（无关变量）对实验结果的影响 Ⅱ 不能

【解析】

影响酶促反应速率的因素主要有：温度、pH、底物浓度和酶浓度．在底物的量充足时，随着酶浓度的增加，酶促反应速率逐渐加快，即缩短到达化学反应平衡点的时间，但酶不会改变化学反应的平衡点。

（1）提取酶时，都要求低温，防止酶活性丧失，加缓冲液作用：使溶液pH值保持相对稳定，保持PPO的活性。

⑵① “温度预处理”之后进行反应，才能保证各个试管是在不同温度下测定PPO活性。

②15℃和30℃温度条件，PPO具有相同的活性原因：在酶的最适温度前后，可以有相同的催化效率 。

③15℃～30℃范围内，PPO活性较高，所以在该温度范围内，有PPO的最适温度。

(3)①该题自变量是不同pH值，因变量为酶活性，所以实验目的是探究不同pH对过氧化氢酶活性的影响。

②30℃是过氧化氢酶的适宜温度，恒温是排除温度变化（无关变量）对实验结果的影响。

(4) A、B曲线相同时间情况下，底物剩余量最多，说明酶量更少，选择Ⅱ组实验。

(5)该实验不能说明酶活性在这个实验中的变化情况，酶量的大小没有影响酶的最适pH值。