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【题目】三孢布拉霉菌能用来生产胡萝卜素,但该菌株的高产性状容易退化,需要定期筛选出高产菌株,研究表明菌体细胞内的[H]可将无色的 TTC 还原为红色复合物,且菌体细胞内[H]含量越高,还原能力越强,胡萝卜素合成能力也越强。请结合下列筛选菌株及提取胡萝卜素的流程图回答问题。

三孢布拉霉菌液→梯度稀释→涂布到含有 TTC 的培养基上→挑取单菌落→扩大培养→收集菌丝并处理→萃取→鉴定

(1)工业生产上提取天然胡萝卜素的方法主要有三种,除可利用上述微生物的发酵生产之外,还可以从植物中提取和从_________中获取。萃取的效率主要取决于萃取剂的_________。萃取的最佳温度和时间可以通过设置___________来摸索。

(2)将菌液涂布到含 TTC 的培养基上,目的是筛选出______________________,对照组需涂布等量的___________以判断培养基是否被污染。挑取单菌落时,若菌落周围___________,则菌株合成胡萝卜素的能力较强。

(3)从该微生物中提取胡萝卜素时,扩大培养后要收集菌丝进行的处理是粉碎和___________,以提高萃取效率。为了验证萃取物是否是胡萝卜素,该同学将叶绿素 b、叶绿素 a、叶黄素、萃取物和色素混合液(含叶绿素 b、叶绿素 a、叶黄素和胡萝卜素)依次点样在滤纸的 1、2、3、4、5 位置(如图甲所示),并进行分离,滤纸条上各色素带的位置_____________(填字母)时,即可说明该萃取物最可能是胡萝卜素。

【答案】 (大面积养殖的)岩藻 性质和使用量 对照实验 合成胡萝卜素较强的菌体(或“高产菌株”) 无菌水 红色较深 干燥 B

【解析】本题考查微生物的分离和培养、植物有效成分的提取相关知识,意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。

(1)工业生产上提取天然胡萝卜素的方法主要有三种,除可利用上述微生物的发酵生产之外,还可以从植物中提取和从岩藻中获取。萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量。萃取的最佳温度和时间可以通过设置对照实验来进行摸索。

(2)因为三孢布拉霉菌能用来生产胡萝卜素,而且菌体细胞内的[H]可将无色的 TTC 还原为红色复合物,高产菌株细胞内[H]含量越高,还原能力越强,胡萝卜素合成能力也越强所以将菌液涂布到含 TTC 的培养基上,目的是筛选出合成胡萝卜素较强的菌体。对照组需涂布等量的无菌水以判断培养基是否被污染。挑取单菌落时,若菌落周围红色较深,说明产生的[H]高,进而说明菌株合成胡萝卜素的能力较强。

(3)从该微生物中提取胡萝卜素时,扩大培养后要收集菌丝进行的处理是粉碎和干燥,以提高萃取效率。根据题干说明5中肯定含有胡萝卜素,而萃取物中要含有胡萝卜素,在样品1,2,3不应该有,而4和5应该有色素带,根据图形分析如果出现B中所示的色素带时,说明萃取物中最可能含有胡萝卜素。

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