Question

【题目】（一）某农业生态园利用自产的蔬果加工食品。请回答：

（1）将种植的葡萄制成葡萄酒和葡萄醋，利用的微生物分别是__________，在制作葡萄酒时，发酵液装量不能超过发酵瓶容量的__________。制作果醋时，可以利用__________技术，将微生物吸附在锯末上进行生产。

（2）将种植的黄瓜等新鲜蔬菜腌制泡菜时，微生物利用新鲜蔬菜中的营养物质进行发酵，会产生_____和亚硝酸。泡菜中的亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生__________反应，产物与 N-1-萘基乙二胺偶联，形成紫红色的产物，根据这一特性可利用__________法定量。

（3）在果酒、果醋和泡菜的生产过程中没有进行严格灭菌也能制作成功，原因是__________。

（二）重组人抗凝血酶Ⅲ（ATryn）可用于预防和控制遗传性抗凝血酶缺乏症患者在手术中或分娩时可能出现的凝血状况，如图为利用转基因山羊生产ATrynn的部分技术路线。请回答：

（1）获得已知序列的ATryn基因可采用__________方法。山羊的ES细胞（胚胎干细胞）能分化出成体动物的所有组织和器官，这体现了ES细胞具有__________性。

（2）一个ES细胞变成ES细胞群的过程中，可出现__________现象，从而使细胞分布为单层。山羊的ES细胞不能发育成完整个体，因此要通过__________技术形成重组细胞，经过__________、胚胎培养、__________，最终由代孕母羊产下克隆山羊。从转基因山羊的乳汁中提取ATryn药物。

（3）下列关于动物细胞培养和核移植的叙述，正确的是____________________。

A.从原代培养物或细胞系中选择和纯化无法获得细胞株

B.动物细胞培养基中添加胰岛素的目的是调节血糖浓度

C.胚胎干细胞培养过程中的饲养层可促进胚胎干细胞分化

D.核移植形成的重组细胞在初次分裂时核基因不转录

Answer 1

【答案】酵母菌和醋酸杆菌 2/3固定化有机酸和醇类物质重氮化光电比色菌种在短时间内大量繁殖，产生大量代谢产物，可抑制杂菌生长化学合成（或PCR扩增）发育全能接触抑制核移植胚激活胚胎移植D

【解析】

1.制作葡萄酒主要利用酵母菌发酵，温度控制在18～25℃，制作葡萄醋主要利用醋酸菌的发酵，温度控制在30～35℃，制作泡菜主要利用乳酸菌，温度控制在28～30℃；2.固定化微生物技术是用化学或物理手段将游离微生物定位于限定的空间区域,以提高微生物细胞的浓度,使其保持较高的生物活性并反复利用的方法。3.分析题图内容：过程①②属于基因工程，过程③属于动物细胞培养，过程④属于核移植。

（一.(1）将种植的葡萄制成葡萄酒和葡萄醋，利用的微生物分别是酵母菌和醋酸杆菌；在制作葡萄酒时，发酵液装量不能超过发酵瓶容量的2/3，防止发酵过程产生的二氧化碳气体释放而引起的发酵基质的膨胀。制作果醋时，可以利用固定化技术，将微生物吸附在锯末上进行生产。

（2）腌制泡菜时，在无氧的条件下，微生物利用新鲜蔬菜中的糖和其他营养物进行发酵，产物有有机酸、醇类物质和亚硝酸等。亚硝酸盐可与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，这一产物再与N-1-萘基乙二胺偶联，形成紫红色产物，可用光电比色法定量。

（3）在果酒、果醋和泡菜的生产过程中没有进行严格灭菌也能制作成功，原因是菌种在短时间内大量繁殖，产生大量代谢产物，如酒精、醋酸等可抑制杂菌生长。

二．（1）扩增已知序列的ATryn基因可用PCR技术；胚胎干细胞在功能上具有发育的全能性，利用此特性可将山羊的ES细胞（胚胎干细胞）分化出成体动物的所有组织和器官。

（2）ES细胞是正常体细胞，其分裂形成细胞群的过程中，若不发生基因突变，则会出现接触抑制现象；动物体细胞的细胞核具有全能性，可将ES细胞的细胞核与卵细胞的细胞质通过核移植技术形成重组细胞，经过胚激活、胚胎培养、胚胎移植，最终由代孕母羊产下克隆山羊。从转基因山羊的乳汁中提取ATryn药物。

（3）从一个经过生物学鉴定的细胞系或原代培养物用单细胞分离培养或通过筛选的方法，克隆具有特殊性质或标志的单细胞获得的细胞群，呈细胞株，A错误；胰岛素的作用是降低血糖，而动物细胞培养不需要调节血糖浓度，B错误；胚胎干细胞培养时，加饲养层是为了抑制胚胎干细胞分化，C错误；核移植形成的重组细胞分裂的准备在重组前已完成，在初次分裂时核基因不转录，D正确．答案选D。