Question

【题目】某研究小组从牛的瘤胃中采集样本，进行分解尿素的微生物的分离与计数。实验基本步骤如下：

（1）分解尿素的微生物含有_______________，因此，配制培养基时以尿素作为唯一氮源，尿素会被分解成_________使培养基的碱性增强。

（2）配制培养基时，需添加琼脂，琼脂起________________作用；培养基中添加___________作为指示剂，可使目标菌落的周围产生红色环带。

（3）对尿素溶液进行灭菌的最适方法是___________灭菌。

A.高压蒸汽 B.干热 C.添加抗生素 D.过滤 E.紫外线照射 F.70﹪酒精浸泡

（4）该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是__________________________；然后将1mL瘤胃样液稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板的菌落数分别为49、47和45。据此可得出每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为__________，理论上，统计的菌落数往往_____（低、等、高）于接种的实际活菌数目。

Answer 1

【答案】 脲酶（分解尿素的酶） 氨（NH3） 凝固剂 酚红 D 检测培养基平板灭菌是否合格 4.7×108 低

【解析】（1）分解尿素的微生物含有分解尿素的酶，将尿素分解成氨，所以分离能分解尿素的细菌时，要以尿素作为选择培养基的唯一氮源。

（2）在配置微生物培养的固体培养基时需要加入琼脂作为凝固剂；培养基中添加酚红作为指示剂，可使目标菌落的周围产生红色环带。

（3）由于尿素在高温下会分解，所以对尿素溶液的灭菌要采用G6玻璃漏斗过滤的方法。

（4）微生物培养过程应该进行无菌操作，配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌，可以将灭菌后的空白平板进行培养以检测培养基灭菌是否彻底；由题意知1ml瘤胃样液中的菌落数是（49+47+45）÷3÷0.1×1000=4.7×105个，所以每升瘤胃样液中的活菌数为4.7×105×103=4.7×108。有些活菌在培养过程中死亡,另外有些菌落是有多个活菌共同形成的,所以按形成的菌落数目来计算活菌数目的话,结果往往会少于活菌实际数目。