Question

【题目】某碱性蛋白酶一般利用枯草芽孢杆菌生产。某科研小组对碱性蛋白酶相关性质进行测试，结果如下图甲、乙所示。图丙、丁为两种常见的平板划线法:连续划线法和四区划线法，前者适用于纯化菌较少的样品，后者适用于纯化菌较多的样品。请据图回答：

（1）由图甲、乙可知，碱性蛋白酶发挥作用的适宜条件为__________________。

（2）图丁中依次进行四区划线，四区的面积要求为C＜D＜E＜F，F区面积最大有利于获得_________。注意F区划线不要与_________（填字母）区相连。

（3）土壤是微生物生活的大本营，某兴趣小组欲从土壤中分离枯草芽孢杆菌，宜选择图_________所示的方法划线培养。若要分离和统计枯草芽孢杆菌，则应采用______________方法培养。

（4）在制备丙培养基时，当温度大约为__________时适合倒平板。丁培养基在划线时接种环至少要灼烧________次。

（5）若应用固定化技术提高该酶的利用率，减少产物中的杂质，则应采用________法。

（6）在一定温度下（35℃），一定时间内，分解1mL10%脱脂奶粉的酶量为一个酶活力单位（U）。科研小组将不同来源的碱性蛋白酶分成七组进行活力检测，结果如图戊所示。 据图分析，酶催化能力最强的是________组。

Answer 1

【答案】 pH为10.2左右和温度为42℃左右 单个菌落 C（C、D） 丁 稀释涂布平板法 50℃ 5 化学结合法（物理吸附） A6

【解析】试题分析：本题考查酶、微生物的分离，考查对酶活性的影响因素、微生物分离方法的理解和识记。解答坐标曲线类题目，首先应明确横纵坐标的含义，根据曲线升降理解横坐标和纵坐标之间的关系。

（1）由图甲、乙可知，碱性蛋白酶发挥作用的适宜条件为pH为10.2左右和温度为42℃左右。

（2）F区面积最大有利于菌体分离，以获得单个菌落。F区划线不应与菌体密度较大的C（C、D）区相连。

（3）土壤中微生物较多，从土壤中分离枯草芽孢杆菌，宜选择图丁所示的方法划线培养。若要分离和统计枯草芽孢杆菌，则应采用稀释涂布平板法培养。

（4）在制备丙培养基时，当温度大约为50℃时适合倒平板。丁培养基在划线时每次接种前和接种后均要灼烧接种环，接种环至少要灼烧5次。

（5）酶分子一般较小，固定化酶应采用化学结合法（物理吸附）法。

（6）在一定温度下（35℃），一定时间内，分解1mL10%脱脂奶粉的酶量为一个酶活力单位（U）。酶量越少，说明酶活力越强。酶催化能力最强的是A6组。