题目内容

图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。下列不正确的是( )

A. 图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖连接
B. 若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,其产物长度为537bp、790bp、661bp
C.若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后形成重组质粒,那么应选用的限制酶是MboI
D.在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加相应抗生素的培养基进行培养

C

解析试题分析:
A项中,DNA单链中相邻两个碱基之间通过“脱氧核糖—磷酸—脱氧核糖”连接,正确;
B项中,Sma I识别的序列为CCCGGG,切割后会产生平末端;图1所示的DNA分子中含有两个Sma I的识别位点,第一个识别位点在左端534bp序列向右三个碱基对的位置;第二个识别位点在右端658bp序列向左三个碱基对的位置,从这两个位点切割后产生的DNA片段长度分别为534+3,796-3-3,658+3,即得到的DNA片段长度分别为537bp、790bp和661bp,正确。
C项中,能够获取目的基因并切开质粒的限制酶有识别序列为GGATCC的BamH I和识别序列为GATC的Mbo I,若使用Mbo I会同时破坏质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因,所以要用BamH I来切割目的基因和质粒,切割后保留了完整的抗生素B抗性基因,便于筛选出含有重组质粒的大肠杆菌。错误。
D项中,重组质粒含有抗生素抗性基因,因此成功导入目的基因的大肠杆菌可以抗抗生素,因此一般需要用添加相应抗生素的培养基进行筛选。正确。
考点:基因工程的操作程序
点评:本题有一定的难度,是一道高考题的变式,考查了学生的识图能力、审题能力、理解能力。

练习册系列答案
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(1)若用限制酶Sma I完全切割图1中所示DNA片段,则其产物有______种,长度分别为______。

(2)若将图2中质粒和目的基因通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是______。

(3 )在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的水稻细胞,需配置相应培养基,其中添加的碳源是______,目的是提供营养和______。另外,培养基中除了含有必要营养物质、琼脂和激素外,一般还需要添加______(抗生素A/抗生素B),该培养基从用途上看属于______培养基。

(4)在培养过程中,除必要的温度、光照和氧气等外界条件外,成功的另一个关键是操作过程必须保证无菌,镊子等器械及培养基都可使用的灭菌方法是______。

 

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