Question

【题目】尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能很好地被植物利用。同学们设计了以下实验来探究土壤中微生物对尿素的分解作用，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分及操作过程如下所示。（10分）

回答问题：

（1）制备培养基的一般步骤：计算→称量→溶化→定容→调整PH→ →倒平板

（2）培养基的类型很多，但培养基中一般都含有 、氮源、水和无机盐，上述培养基中“目的菌”生长所需的碳源和氮源分别是 和 ，从用途划分这种培养基属于

培养基，而从物理性质的角度划分属于 培养基。

（3）分离纯化微生物最常使用的接种方法是__ __和___ ___两种。

（4）为充分说明上表所示培养基具有选择作用，应配制牛肉膏蛋白胨培养基作为实验对照，如果该培养基上的菌落数明显 （选填“多于”或“少于” ）表中培养基中的菌落数目，说明表中培养基已筛选出一些目的菌。

（5）对分离的菌种进行鉴定时，需要在上述培养基中加入酚红指示剂，细菌合成的脲酶 将尿素分解为氨，pH增高，使指示剂变 。

Answer 1

【答案】（1）灭菌 （2）碳源 葡萄糖 尿素 选择 固体 （3）平板划线法 稀释涂布平板法 （4）多于 （5）红色

【解析】（1）制备培养基的一般步骤：计算→称量→溶化→定容→调整PH→灭菌→倒平板。（2）培养基的类型很多，但培养基中一般都含有碳源、氮源、水和无机盐。“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别有含氮元素的尿素和含碳元素的葡萄糖提供。按功能不同，培养基可分成两类，鉴别培养基和选择培养基，培养基中不加其它氮素，只把尿素作为唯一氮源，其目的是想从众多微生物中选出能分解尿素的目的菌，所以属于选择培养基。按物理性质分，上述培养基添加了较多的琼脂，所以属于固体培养基。（3）分离纯化微生物最常使用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法两种。（4）为充分说明上表所示培养基具有选择作用，应配制牛肉膏蛋白胨培养基作为实验对照，如果该培养基上的菌落数明显多于表中培养基中的菌落数目，说明表中培养基已筛选出一些目的菌。（5）目的菌之所以能利用尿素，是因为体内的脲酶能将尿素分解成氨，氨可以作为细菌的氮源，同时会使培养基的pH升高，升高的PH会使酚红指示剂变为红色，因此可以通过检测培养基pH的变化来判断尿素是否被分解。