Question

【题目】基因工程

如图为三种质粒和一个含目的基因的DNA片段，其中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，EcoRⅠ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8Kb）等为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离。已知1kb=1000个碱基对的长度。请回答下列问题：

（1）基因工程中，为什么通常要选用质粒来运载目的基因？______。

（2）片段D为目的基因中的某一片段，则限制酶和DNA连接酶的作用部位依次是______、______（填图中数字标号）。

（3）图中能作为目的基因运载体最理想的质粒是______（填A/B/C），据图分析，其他两种质粒一般不能作为运载体的理由分别是______。

（4）如果将目的基因和质粒A构建重组质粒，然后再用EcoRI酶切这个重组质粒，进行电泳观察，可出现长度分别为1.1kb和______kb的两个片段，或者长度分别为______kb、______kb的两个片段。

（5）动物基因工程通常以受精卵作为受体细胞的根本原因是______（单选）。

A、受精卵尺寸较大，便于DNA导入操作

B、受精卵细胞能使目的基因高效表达

C、受精卵基因组更易接受DNA的插入

D、受精卵可发育成动物个体

Answer 1

【答案】能自我复制，含有多个限制酶切割位点，具有特殊的标记基因 ② ② B 质粒A缺少标记基因，质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时，复制原点会被破坏 5.6 3.1 3.6 B

【解析】

分析题图：如图所示为三种质粒和一个含目的基因的DNA片段示意图。图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因．EcoRⅠ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8Kb）等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离。片段D中，①是氢键，②是磷酸二酯键。

（1）质粒常作为运载体的原因是能自我复制，含有多个限制酶切割位点，具有特殊的标记基因。

（2）DNA聚合酶和DNA连接酶的作用部位均为磷酸二酯键，即图中部位②。

（3）图中质粒A缺少标记基因；质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时，复制原点会被限制酶切割，会影响重组质粒的自主复制。因此，能作为目的基因运载体最理想的质粒是B。

（4）目的基因和质粒B形成的重组质粒长度为2.7-0.1+（4.0-1.0）=5.6kb（质粒且切割后形成的大的片段+切割目的基因时形成的大片段）、0.1+1.0=1.1kb（质粒且切割后形成的小的片段+切割目的基因时形成的小片段）或2.7-0.1+1.0=3.6（质粒且切割后形成的大的片段+切割目的基因时形成的小片段）、0.1+3.0=3.1（质粒且切割后形成的小的片段+切割目的基因时形成的大片段）。

（5）动物基因工程通常以受精卵作为受体细胞的根本原因是受精卵细胞能使目的基因高效表达.