题目内容
【题目】回答下列(一)、(二)小题：
(一)高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示。
(1)Ⅰ号培养基从物理状态来看，属于固体培养基，配制时要加入__________作为凝固剂；从用途来看属于选择培养基，应以________作为唯一碳源。
(2)配制固体培养基的基本步骤是________。
A．计算、称量、倒平板、融化、灭菌
B．计算、称量、融化、倒平板、灭菌
C．计算、称量、融化、灭菌、倒平板
D．计算、称量、灭菌、融化、倒平板
(3)融化时烧杯中加入琼脂后要不停地________，防止琼脂糊底引起烧杯破裂。对培养基灭菌的方法一般为______________。
(4)①过程是________，②过程所使用的接种方法是________法。
(5)部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放_______分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈，挑选相应的菌落，接种到Ⅱ号培养基进一步分离纯化后，再对菌种进行_______培养。
(二)科学家通过基因工程成功培育出能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉，其过程大致如下图所示，据图回答下面的问题：
(1)Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T－DNA，把目的基因插入Ti质粒的T－DNA中是利用T－DNA__________________________________的特性。
(2)抗虫基因转入普通棉花植株内并成功表达的过程，在基因工程中称为________。
(3)将目的基因导入受体细胞中的方法很多，该题中涉及的是________________。
(4)目的基因能否在棉花植株体内稳定维持和表达其遗传物质的关键是_____________。这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是________________________________________。
【答案】 琼脂 淀粉 C 搅拌 高压蒸汽灭菌 稀释 涂布分离 淀粉酶 扩大 可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体的DNA上 转化 农杆菌转化法 目的基因是否插入了受体细胞的染色体 DNA上 DNA分子杂交技术
【解析】试题分析：据图分析：（一）①过程是梯度稀释，②过程是稀释涂布平板法接种，目的是筛选单菌落。从功能上看，Ⅰ号培养基属于选择培养基，从物理状态上来说。Ⅱ号培养基属于固体培养基。采用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法。常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌和干热灭菌。（二）分析题图：图示为抗虫棉的培育过程，首先获取目的基因，构建基因表达载体；其次采用农杆菌转化法将目的基因导入棉花细胞；最后采用植物组织培养技术将转基因细胞培育成转基因植株。
(一) (1)固体培养基，配置时常加入琼脂作为凝固剂，选择培养基其目的是筛选出高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，所以仅以淀粉作为唯一的碳源。
(2)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，故选C。
(3)融化过程，烧杯中加入琼脂后要不停地搅拌，防止琼脂糊底引起烧杯破裂。对培养基灭菌的方法一般为高压蒸汽灭菌。
（4）图中①过程是稀释嗜热菌培养液的过程，接种嗜热菌即②过程常用稀释涂布平板法。
(5)部分嗜热菌在Ⅰ培养基上生长时可产生淀粉酶，分解培养基中的淀粉后会在菌落周围形成透明圈，挑选相应的菌落，接种到Ⅱ号培养基进一步分离纯化后，再对菌种进行扩大培养。
(二) （1）农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。
（2）Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现了表达的过程，在基因工程中称为转化。
（3）由图可知，题中将目的基因导入受体细胞的方法是农杆菌转化法。
（4）目的基因是否插入到受体细胞染色体DNA上是目的基因能否在棉株体内稳定遗传的关键。可通过DNA分子杂交技术进行检测目的基因是否导入受体细胞。
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