题目内容
【题目】某些糖尿病患者因胰岛B细胞被完全破坏，分泌胰岛素的功能丧失，需要通过注射胰岛素来补充。目前，该类患者对胰岛素的需求量越来越大。回答下列问题：
(1)在利用基因工程大规模生产胰岛素时，将胰岛素合成基因与质粒重组后导入大肠杆菌进行了表达。以上过程除了证明质粒可以作为载体外，还证明了_______、_________等。
(2)构建基因表达载体时，常用的工具酶是_________，他们作用的化学键是___________。基因工程中，不能将胰岛素合成基因直接导入大肠杆菌，其原因是__________。
(3)检测胰岛素合成基因是否导入受体菌时，常用_______作探针。
(4)胰岛素合成基因在大肠杆菌细胞内表达时，遗传信息的传递方向是_____。经检测，胰岛素合成基因的表达产物未能达到预期的生物活性，导致这种差异的原因可能是表达产物未经______的加工。
【答案】体外重组的质粒可以进入大肠杆菌 真核外源基因可以在原核细胞中表达等 DNA连接酶和限制性核酸内切酶 磷酸二酯键 胰岛素合成基因在大肠杆菌细胞中不能稳定遗传和表达 (放射性物质标记的)胰岛素合成基因(的一条链) DNA→(m)RNA→蛋白质 内质网、高尔基体
【解析】
要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，这是目的基因能否在真核细胞中稳定遗传的关键。检测的方法是采用DNA分子杂交技术，即将转基因生物的基因组DNA提取出来，在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素作标记，以此作为探针，使探针与基因组DNA杂交，如果显示出杂交带，就表明目的基因已插入染色体DNA中。
（1）在利用基因工程大规模生产胰岛素时，将胰岛素合成基因与质粒重组后导入大肠杆菌进行了表达，以上过程除了证明质粒可以作为载体外，还证明了体外重组的质粒可以进入大肠杆菌，真核外源基因可以在原核细胞中表达等。
（2）构建基因表达载体时，常用的工具酶是DNA连接酶和限制性核酸内切酶，他们作用的化学键是磷酸二酯键。基因工程中，不能将胰岛素合成基因直接导入大肠杆菌，其原因是胰岛素合成基因在大肠杆菌细胞中不能稳定遗传和表达。
（3）基因是有遗传效应的DNA片段，检测胰岛素合成基因是否导人受体菌时，常用（放射性物质标记的）胰岛素合成基因（的一条链）作探针。
（4）基因的表达包括基因的转录和翻译，胰岛素合成基因在大肠杆菌细胞内表达时，遗传信息的传递方向是DNA→（m）RNA→蛋白质。经检测，胰岛素合成基因的表达产物未能达到预期的生物活性，导致这种差异的原因可能是表达产物未经内质网、高尔基体的加工。
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